天山花楸中总黄酮含量的测定.docVIP

　　天山花楸中总黄酮含量的测定 【摘要】 目的采用比色法测定天山花楸中总黄酮的含量。 方法 以芦丁作对照品，以亚硝酸钠-硝酸铝-氢氧化钠体系为显色剂,检测波长为510 nm。结果线性范围为0.0103～0.0515 mg·ml-1，平均回收率为98.8%，相对标准偏差(RSD)为1.3%。结论 该法为控制天山花楸的内在质量提供了依据。 【关键词】 天山花楸 总黄酮 比色法 　　Abstract:Objective To analyze the total content of flavonoids in Sorbus tianschanica Ruper by colorimetric method.MethodsRutin . Results The linearity of flavonoids g/ml,average recovery rate ethod can be used for the control of the inherent quality in Sorbus tianschanica Ruper. 　　Key etric method 　　天山花楸为蔷薇科花楸属植物天山花楸Sorbus tianschanica Ruper 的嫩枝叶，为落叶乔木或灌木［1］。全世界约有80种, 我国约有50种, 主要分布在东北、西北、西南等地区,新疆地区有3种，主要分布在新疆哈密至伊犁的天山山脉里。用于 治疗 慢性气管炎、肺结核、哮喘、咳嗽、水肿、胃痛，具有平喘及依赖性地抑制心肌收缩和保护心肌缺血等病症［2］。天山花楸味甘苦，性平，具有补脾生津的作用。民间常以嫩枝叶，果实和茎皮入药用［3］。为了进一步开发和利用其药用价值，本实验对天山花楸的总黄酮含量进行了测定， 目前 尚未见相关报道。 　　1 仪器与试剂 　　TU1800型紫外分光光度计(北京普析通用仪器有限责任公司)；电热恒温水浴锅（型号：HHS4）； 电子 天平（型号：AB104N）； 芦丁对照品由 中国 药品生物制品检定所提供，亚硝酸钠、硝酸铝、氢氧化钠、甲醇试剂均为 分析 纯，实验用水为蒸馏水。 　　天山花楸野生，200507采集于新疆米泉铁仓沟，经新疆医科大学生药学教研室帕丽达教授鉴定为Sorbus tianschanica ruper的嫩枝叶。 　　2 方法与结果 　　2.1 天山花楸黄酮类化合物的提取取天山花楸2.5 g精密称定，置100 ml圆底烧瓶中，加入甲醇50 ml，回流2 h，滤过，提取液置100 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，待用。 　　2.2 标准曲线的绘制精密称取芦丁对照品10.3 mg,置100 ml容量瓶中，加入甲醇70 ml，置水浴中微热使溶解，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，得浓度为0.103 mg·ml-1的标准溶液。精密???取对照品溶液0.0，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 ml，置10 ml量瓶中，分别加甲醇5 ml，再分别加5%NaNO2溶液0.3 ml，摇匀，放置6 min；再加10%Al（NO3）3溶液0.3 ml，摇匀，放置6 min；再加10%NaOH溶液4.0 ml，摇匀，室温放置15 min。在510 nm波长处测定吸光度，同时以试剂空白作参比。以吸光度为纵坐标，溶液质量浓度为横坐标，绘制标准曲线。 　　2.3 测定波长的选择精密吸取3.0 ml芦丁,余下部分按2.2项下 方法 操作，在紫外-可见分光光度计上，波长400～800 nm扫描，确定最大吸收波长为510 nm。 　　2.4 标准曲线与回归方程结果表明，芦丁标准溶液浓度在0.010 3～0.515 mg·ml-1范围内，线性关系良好。得到回归方程：A=10.246C-0.075，相关系数r=0.997 9。 　　2.5 天山花楸总黄酮含量的测定精密量取样品溶液2 ml，置10 ml量瓶中，余下部分按2.2项方法操作，在510 nm波长处平行测定5次，同以样品空白做参比。根据回归方程， 计算 总黄酮浓度。根据公式：总黄酮含量=（黄酮化合物质量/样品质量）×100%，得天山花楸总黄酮含量。结果见表1。 　　表1 天山花楸总黄酮含量测定结果（略） 　　2.6 精密度实验取一定质量浓度的供试品溶液，按2.2项显色，连续测定5次。结果见表2，采用本法测定天山花楸总黄酮含量，精密度良好，其相对标准偏差RSD为0.3%。 　　表2 精密度实验结果（略） 　　2.7 稳定性实验取对照品溶液及供试品溶液，按2.2项显色，于室温分别放置0，15，30，45，60 min，测定对照品及供试品溶液吸光度，其RSD分别为1.3%，0.9%。表明对照品及供试品溶液在1 h内稳定。结果见表3。 　　2.8 回收率实验精密称取已知量的天山花楸6份，分