强心Ⅰ号方强心作用有效部位提取与分离.docVIP

　　强心Ⅰ号方强心作用有效部位提取与分离 作者：胡军娜，贾继明，王宏涛，赵宝华，郑亚杰，唐思文，徐登峰，赵韶华 【摘要】 　　目的提取分离强心Ⅰ号方强心作用的有效部位。方法以大孔吸附树脂为分离材料，将强心Ⅰ号方组成药材的水提物、醇提物分别经蒸馏水，10%乙醇，30%乙醇，50%乙醇，70%乙醇，95%乙醇洗脱制得样品，然后通过离体蛙心试验观察受试样品的强心作用。结果水提物经30%乙醇，50%乙醇洗脱的样品和醇提物经30%乙醇，50%乙醇洗脱的样品对离体蛙心作用明显，其强心作用的半数有效浓度分别为：0.017g生药/ml，0.58 g生药/ml，10.11 g生药/ml，21.44 g生药/ml。结论强心Ⅰ号方中各味药材的水提物经30%乙醇，50%乙醇洗脱的样品和醇提物经30%乙醇，50%乙醇洗脱的样品具有明显强心作用。 【关键词】 强心Ⅰ号方； 有效部位； 大孔树脂； 强心作用； 离体蛙心 　　Abstract：ObjectiveTo extract and isolate the effective ingredients in Cardiac Ⅰ pound.MethodsMacroporous absorption resin ples ent of the frog isolated heart.ResultsThe locus of l， 0.58 g crude drugs /ml，10.11 g crude drugs /ml，21.44 g crude drugs /ml,respectively.ConclusionThe locus of l。以1BV（1倍柱体积，即12 kg的AB-8树脂折算体积为18l）的流速（即18 L/h，300 ml/min）通过树脂柱，上样完成后依次用4BV量（18×4=72 L）的蒸馏水及10%，30%，50%，70%和95%的乙醇进行洗脱，分别收集洗脱液。 　　2.2.3 水提物的分离水提物加蒸馏水稀释至密度为0.1 g药材/ml。以1BV（1倍柱体积，即13 kg的AB-8树脂折算体积为20 L）的流速（即20 L/h，340 ml/min）通过树脂柱，上样完成后依次用4BV量（20×4=80 L）的蒸馏水及10%，30%，50%，70%和95%的乙醇进行洗脱，分别收集洗脱液。 　　2.2.4 洗脱液的浓缩将不同浓度洗脱液分别用浓缩机组（30%，50%，70%，95%乙醇）、夹层锅（蒸馏水、10%乙醇）进行初步浓缩，然后在旋转蒸发仪中进一步浓缩至适当浓度。 　　2.2.5 干燥及称量将不同乙醇浓度洗脱液，先在鼓风干燥箱中吹至呈浓浸膏状，在真空干燥机里进行减压干燥，干燥后称量各个洗脱部位的重量， 计算 出每克有效部位相当于的生药量(g/g)。 　　2.3 离体蛙心实验 　　2.3.1 离体蛙心预实验受试物 参考 24.8g生药剂量按1∶0.5的剂距设置剂量，将受试物溶解成合适浓度后，进行实验。 　　实验方法：取制备好的离体蛙心［2～5］，打开BL-420E+生物机能实验信号采集系统，观察蛙心收缩曲线，待稳定后记录正常蛙心收缩曲线；将蛙心套管内任氏液换成低钙任氏液，在心脏收缩显著减弱时记录心衰模型蛙心收缩曲线；向蛙心套管内滴加受试物，对照组加等量任氏液，记录蛙心收缩曲线，以观察各样品是否有强心作用。 　　2.3.2 离体蛙心半数有效浓度实验具有强心作用的样品分别配制成0.1，0.05，0.025，0.012 5，0.006 25，0.003 125g干粉/ml的浓度，按预实验方法进行实验，采集给药前后心脏最大收缩力，按以下公式 计算 强心率（QXL）：QXL＝（给药后最大收缩力－给药前最大收缩力）×100% /给药前最大收缩力。 　　2.3.3 统计方法采用BLISS软件计算半数有效浓度。 　 　3 结果 　　3.1 大孔树脂分离各部位 　　3.1.1 醇提物经不同浓度洗脱液洗脱后所得到的有效部位见表1。 　　表1 醇提物洗脱液洗脱所得有效部位（略） 　　3.1.2 水提物经不同浓度洗脱液洗脱后所得到有效部位见表2。 　　表2 水提物洗脱液洗脱所得有效部位（略） 　　3.2 离体蛙心实验结果水提取部位有效性筛选结果：］.合肥：安徽 科学 技术出版社，1995：204. 　　［3］ 张风芝.生理学,第2版［M］.北京:人民卫生出版社,1994:174. 　　［4］ 望文桢,张 颖.如何提高蛙心插管的成功率［J］.2003,21（4）:128. 　　［5］ 邓天勤,谢振生,张玉婵.蛙心灌流实验中蛙心插管方法的改进［J］.卫生职业 教育 ,2006,24（18）:99. 　　［6］ 于纯淼，于栋华，于国萍.丹参酮的提取工艺研究［J］.中国中医药科技，200