心复康对心肌梗塞后大鼠心肌血管新生的影响.docVIP

　　心复康对心肌梗塞后大鼠心肌血管新生的影响 作者：郭茂娟，范英昌，徐秀梅，赵旭 【摘要】 　　目的观察中药心复康对心肌梗塞后大鼠心肌血管新生的影响，探讨其对缺血心肌可能的保护机制。方法将大鼠随机分为假手术组、模型组、中药高剂量组和中剂量组，每组12只。模型组及中药组采用冠状动脉结扎法制作心肌梗塞模型。中药高剂量组（81 g·kg-1·d-1）和中剂量组(40.5 g·kg-1·d-1)给予中药心复康水煎剂灌胃，假手术组和模型组每天等量生理盐水灌胃。给药4周后处死大鼠，通过免疫组化方法，测定血管内皮细胞粘附分子CD31的表达以了解缺血心肌血管新生情况，检测血管内皮生长因子(VEGF)、碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的蛋白表达情况。结果中药高剂量组CD31的表达明显高于模型组，中药组VEGF及bFGF的表达量均明显高于模型组。结论心复康通过上调VEGF和bFGF的表达，能够有效促进血管新生，改善缺血心脏功能，挽救缺血的心肌。 【关键词】 心复康；心肌梗塞；血管新生 　　Abstract：ObjectiveTo study the effect of Xinfukang on angiogenesis after myocardial infarction (MI) in rats. MethodsMyocardial infarction ale rats. Tly divided into myocardial infarction control group, sham-operated group, Xinkukang middle dose group and Xinfukang high dose group. After 4 munohistochemistry. Resultspared operated, Xinfukang high dose group could enhance expression of CD31,VEGF,bFGF. ConclusionXinfukang can enhance angiogenesis after MI in rats and improve ischemia cardiac function . 　　Key age Pro Plus6.0美国)。 　　1.2 动物模型的建立、分组和处理实验动物用乙醚全身麻醉后，进行常规被皮消毒，于左胸部第四肋间切开皮肤，钝性分离肌肉压右胸，挤出心脏，于肺动脉圆锥与左心耳间、距左冠脉起源2～3 mm 处，用带0 号丝线弯针结扎冠状动脉，通过观察左室表面局部发绀和心电图S-T段呈单向曲线，标志结扎成功［2,3］。随后将心脏送回胸腔，排出胸腔内空气，缝合切口，局部予青霉素注射预防感染，假手术组穿线但不结扎。除去在术中死亡的大鼠，手术后存活的大鼠随机分组，分为高剂量心复康组、中剂量心复康组，模型组及假手术组，每组可分得12只。术后每天定时灌胃，高剂量心复康组给予心复康81 g·kg-1·d-1（相当于成人临床剂量10倍的浓度）和中剂量心复康组给予心复康40.5 g·kg-1·d-1（相当于成人临床剂量5倍的浓度），假手术组和模型组给予等量的生理盐水。 　　1.3 标本留取和处理28 d后颈椎脱臼处死动物，取出心脏并用冰生理盐水洗净，剪除大血管及附着的结缔组织，称重放入10%中性甲醛内, 用于石蜡包埋切片。 　　1.4 指标检测 　　1.4.1 计数新生血管数CD31CD31是为内皮细胞的特异性功能标志，经DAB染色可特异性着色血管内皮细胞，通过观察CD31表达可判定新生血管的情况。血管内皮细胞均被染成黄、棕色。低倍光学显微镜(100×)下找到血管密度较大区域，再转到高倍视野(400×)下精确计数单位面积微血管数量。随机测定8个视野，取其均值作为测定值。 　　1.4.2 用病理图像分析仪测VEGF和bFGF平均光密度指标判定标准：心肌组织中VEGF 表达：以心肌细胞胞浆内或细胞外基质出现棕黄色颗粒为阳性判定标准。bFGF的表达：阳性信号存在于心肌梗塞灶、边缘区内尚存的心肌细胞、血管内皮细胞及骨髓干细胞内，镜下呈棕黄色为阳性细胞。免疫组化阳性反应强度，用图像分析系统进行定量分析。阳性反应强度用IOD 值表示，IOD值=阳性反应面积/平均光密度。 　　1.5 统计学方法 　　所有数据以±s表示, 数据应用SPSS11.5 软件包单因素ANOVA( 方差分析) 方法进行差异显著性检验。Plt;0.05 有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 心复康对血管新生数目CD31表达的影响模型组CD31阳性细胞数量较假手术组表达升高，高剂量心复康组CD31阳细胞数量高于模型组，且有统计学差异，中剂量心复康组CD31阳性细胞数