慢性脑缺血致认知功能障碍大鼠皮层Rho激酶表达变化.docVIP

　　慢性脑缺血致认知功能障碍大鼠皮层Rho激酶表达变化 作者：王晓明 徐忠信 莽靖 魏爱宣 赵晴 钱佳丽　李宗树 【摘要】 目的 探讨慢性脑缺血致大鼠认知功能障碍与Rho激酶（ROCK）及作用产物α平滑肌激动蛋白（SMA）表达变化。方法 健康雄性A) in the rats ia. Methods 54 healthy male A expressions easured by immunohistochemistry. Results The escape latency and s distance of model and fasudil groups operation group（P＜0.05）. Expressions of ROCK2 and αSMA increased significantly in ischemia group since 3 ia, proved significantly, having obvious difference from those of model group（P＜0.05）.Conclusions Upregulation and activation ROCK interfere ia, fasudil has protective effect of neuron and can improve learning and memory function. 【Key ia; Cognitive function; Rho kinsase (ROCK); Fasudil 　　 慢性脑缺血致认知功能障碍研究已成为研究的热点，其损伤机制尚未阐明。关于Rho激酶（ROCK）在慢性脑缺血致认知功能障碍方面研究尚未见报道。本研究首次拟以ROCK为靶点，观察慢性脑缺血后产生认知功能障碍神经元ROCK及其作用产物α平滑肌激动蛋白（SMA）表达变化，并应用Rho/ROCK信号通路的选择性蛋白激酶抑制剂法舒地尔进行干预，以期从ROCK角度探讨慢性脑缺血致认知功能障碍脑损伤机制，为其防治提供新的 治疗 靶点，为临床预防和治疗提供新思路。 1 材料与方法 1.1 动物分组 健康雄性orris水迷宫实验筛选后，随机分为：假手术组、模型组和法舒地尔组，每组再根据缺血时间分为3、6、9 g/kg体重，每日1次腹腔注射，连续注射21 d。其他两组以等量生理盐水灌胃。 1.3 Morris水迷宫实验 采用Morris水迷宫检测空间学习记忆能力，Morris水迷宫由圆形水池、自动摄像机及电脑分析系统组成，数据采集及图像分析均由图像自动监视和处理系统完成。 1.4 ROCK2及αSMA免疫组织化学染色 免疫组化染色采用SP法，ROCK2及αSMA一抗为武汉博士德公司产品。细胞浆、胞膜染成棕黄色为阳性细胞。应用彩色病理图像分析系统，对所有切片在同一光强度下，每张切片选取3个200×镜下视野计数阳性细胞数，以单个标本为单位，取平均值。 1.5 统计学分析 数据以x±s表示，采用SPSS11.0软件进行组间方差分析。 2 结 果 2.1 各组大鼠不同缺血时间学习记忆能力变化 术后大鼠找到平台所用时间越长，在此期间走的距离越长，表明其学习记忆保持能力越差，提示学习记忆受损严重。缺血3、6、9 . 2.2 各组大鼠不同缺血时间ROCK2及αSMA表达变化 假手术组神经细胞数量、形态分布正常，有弱阳性ROCK2、αSMA表达。缺血3 pairment〔J〕. Am J Geriatr Psychiatry, 2006; 14: 72433. 2 De Sarno P, Shestopal A, Zmijeuscarinic receptor activation are mediated by Rho kinase〔J〕. Brain Res, 2005；1041(1):1125. 3 Yamashita K, Kotani Y, Nakajima Y, et al. Fasudil, a Rho kinase (ROCK) inhibitor, protects against ischemic neuronal damage in vitro and in vivo by acting directly on neurons〔J〕. Brain Res, 2007；1154:21524. 4 Shin HK, Salomone S, Potts EM, et al. Rhokinase inhibition acutely augments blood floia via endothelial mechanisms〔J〕. Cereb Bl