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;动物细胞工程常用的技术手段:;2.2.1动物细胞培养和核移植技术;动物细胞培养;(一)、概念;一、动物细胞培养过程;(三)、过程;细胞贴壁:培养贴附性细胞时,细胞要能贴附于底物上才能生长繁殖.;细胞接触抑制;有关概念;归纳
过程;;有关概念;思考题:;3、胰蛋白酶的作用是什么呢?由此可说明细胞间的物质是什么成份?;;
1)无菌、无毒的环境:
①对培养液和所有培养用具进行无菌处理;
②通常在培养液中添加一定量的抗生素;
③定期更换培养液。
2)营养:
①合成培养基
糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。
②常加入血清、血浆等天然成分。;3)温度和pH:
①温度:
哺乳动物多以36.5±0.5℃为宜。
②pH:
7.2~7.4
4)气体环境:
O2-----细胞代谢所需
CO2---维持培养液的PHCO2
;无茵、无毒的环境 ; 细胞体外培养的适宜温度一般与动物的______相近,哺乳动物多以____________℃为宜。多数细胞生存的适宜pH 为_____________。 ;(五)、动物细胞培养的应用
1)生产生物制品:
如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体等。
2)基因工程:
动物细胞是基因工程中常用的受体细胞中。
3)检测有毒物质和判断毒性
4)应用于科研
科学家培养正常细胞或病变细胞,用于生理、病理、药理等方面的研究。如筛选抗癌药物等。;植物组织培养和动物细胞培养的比较;1、动物细胞工程技术的基础是( ) A、动物细胞融合 B、胚胎移植 C、动物细胞培养 D、核移植2、在生物工程中一般都要用到酶,下列酶中属于动物细胞工程最常用的工具酶的是
A.限制酶 B.DNA连接酶 C.果胶酶 D.胰蛋白酶;3、在动物细胞培养过程中,使用胰蛋白酶的目的是 ( )
A.使动物组织分散为单个细胞进行培养B.去掉细胞壁成为原生质体
C.去掉细胞膜暴露出原生质体便于细胞融合D.促进蛋白质水解为多肽
4、在进行动物细胞培养时,通常选用的培养材料是 ( )
A、衰老退化的动物组织细胞
B、成熟动物个体的体细胞C、动物的受精卵细胞
D、动物胚胎或幼龄动物个体的细胞;5、下列有关动物细胞培养的叙述中正确的是
( )A、动物细胞培育的目的是获得大量的细胞分泌蛋白B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散C、细胞的癌变发生于原代培养向传代培养的过渡过程中D、培养至50代后的传代细胞称为细胞株;动物体细胞核移植技术和克隆动物;(一)、动物细胞核移植的概念:;(二)、分类:;(三)、体细胞核移植的过程;整个过程用了哪些技术?
细胞培养、核移植、胚胎移植
新生牛的性别、基因?
与供体相同
繁殖方式?
无性繁殖
原理?
动物细胞核的全能性;卵母细胞去核;克隆羊培育过程
核移植技术;2、濒危物种增数量。;
1)成功率很低
代孕母体产下的活的克隆动物占移植克隆胚胎的比率平均不到10%。
2)克隆动物存在健康问题
许多克隆动物表现出遗传和生理缺陷,如体型过大、异常肥胖、发育困难、脏器缺陷、免疫缺陷等。
3)克隆技术的各个环节有待进一步改进
4)克隆动物的产品存在争议。;(二)、体细胞核移植的过程:;P49讨论:;
培养的动物细胞一般当传代至10~50代左
右时,部分细胞核型可能会发生变化,其细胞
遗传物质可能会发生突变,而10代以内的细胞
一般能保持正常的二倍体核型。因此,在体细
胞核移植中,为了保证供体细胞正常的遗传基
础,通常采用传代10代以内的细胞。
;3.你认为用上述体细胞核移植方法生产的克隆动物,是对体细胞供体动物进行了100%的复制吗?为什么?
; 2、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 ( )
A.获得不死性的细胞 B.10代以内细胞
C.原代细胞 D.传代细胞;3、在动物细胞培养的有关叙述中正确的是:( )
A、动物细胞培养的目的只是为了获得大量的细胞 分泌蛋白
B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散
C、细胞的癌变发生在原代培养向传代培养的过渡 过
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