核酸合成[RNA].pptVIP

RNA的生物合成 (转录);在RNA聚合酶的催化下，以一段DNA链为模板合成RNA，从而将DNA所携带的遗传信息传递给RNA的过程称为转录。 经转录生成的RNA有多种，主要的是rRNA，tRNA，mRNA，snRNA和HnRNA等。;复制和转录的区别 ;第 1节 RNA转录合成的特点; ;能够转录RNA的那条DNA链称为模板链(template strand) ，也称作有意义链或Watson链。 而与之互补的另一条DNA链称为编码链(coding strand)，也称为反义链或Crick链。 ;5? 3?;5′···GCAGTACATGTC ···3′;RNA转录合成时，以DNA作为模板，在RNA聚合酶的催化下，连续合成一段RNA链，各条RNA链之间无需再进行连接。;RNA转录合成时，只能向一个方向进行聚合，所依赖的模板DNA链的方向为3→5，而RNA链的合成方向为5→3。 ;RNA转录合成时，只能以DNA分子中的某一段作为模板，故存在特定的起始位点和特定的终止位点。 特定起始点和特定终止点之间的DNA链构成一个转录单位，通常由转录区和有关的调节顺序构成。 ;第2节 参与转录合成的酶和蛋白因子; ;这是一种不同于引物酶的依赖DNA的RNA聚合酶（DDRP）。 该酶在单链DNA模板以及四种核糖核苷酸存在的条件下，不需要引物，即可从5→3聚合RNA。 ;原核生物中的RNA聚合酶全酶由五个亚基构成，即?2???。 ?亚基与转录起始点的识别有关，在转录合成开始后被释放；余下的部分（?2??）被称为核心酶，与RNA链的聚合有关。 ;核心酶 (core enzyme);原核生物RNA聚合酶亚基的功能;真核生物中的RNA聚合酶可按其对?-鹅膏蕈碱的敏感性而分为三种，它们均由10～12个大小不同的亚基所组成，结构非常复杂，其功能也不同。 ;RNA聚合酶Ⅱ的分子结构;酵母RNA聚合酶Ⅰ和Ⅱ的电子晶体图;在真核生物中，转录的起始过程较为复杂。现已发现数百种蛋白因子与RNA转录合成有关，这些蛋白因子被统称为反式作用因子(trans-acting factor)。 在反式作用因子中，直接或间接参与转录起始复合体的形成的蛋白因子被称为转录因子（transcriptional factor, TF)。 不同的RNA聚合酶存在相应的转录因子，如与RNA聚合酶Ⅱ相关的转录因子包括 TFⅡA，TFⅡB，TFⅡD，TFⅡE，TFⅡF，TFⅡH等。;真核生物RNA聚合酶Ⅱ转录因子及其功能;原核生物中的终止因子ρ蛋白是一种六聚体的蛋白质，亚基的分子量为50kd。 该蛋白因子能识别转录终止信号，并与RNA紧密结合，导致RNA的释放。;第3节 RNA转录合成的过程;（一）转录起始;原核生物一个转录区段可视为一个转录单位，称为操纵子(operon)，包括若干个结构基因及其上游(upstream)的调控序列。 DNA分子上参与转录调控的序列统称为顺式作用元件（cis-acting element）。;原核生物转录起始时，首先由RNA聚合酶中的?因子识别转录起始点，并促使核心酶结合形成全酶复合物。 RNA的合成不需要引物。体外实验证明，不含σ亚基的核心酶会随机地在一个基因的两条链上启动，当有σ亚基时就会选择正确的起点。 位于基因上游，与RNA聚合酶识别、结合并起始转录有关的一些DNA调控序列被称为启动子（promoter)。 启动子序列通常由一些带共性的保守序列构成。;σ亚基起着识别DNA分子上的起始信号（启动子——指RNA聚合酶识别、结合和开始转录的一段DNA序列）的作用。启动子的结构至少由三部分组成： -35序列提供了RNA聚合酶全酶识别的信号； -10序列是酶的紧密结合位点（富含AT碱基，利于双链打开）； 第三部分是RNA合成的起始点。;开始转录;原核生物转录起始区的一致性序列;被RNA聚合酶辨认的区段就是位于转录起始点-35区的TTGACA序列。 酶与该区结合后，即滑动至-10区的TATAAT序列（Pribnow盒） ，并启动转录。 ;RNA聚合酶全酶在转录起始区的结合 ;⑵ DNA局部双链解开。;?因子从全酶上脱离，余下的核心酶继续沿DNA链移动，按照碱基互补原则，不断聚合RNA。 1. ?亚基脱落，RNA–pol聚合酶核心酶变构，与模板结合松弛，沿着DNA模板前移； 2. 在核心酶作用下，NTP不断聚合，RNA链不断延长。;RNA转录的延长;转录空泡(transcription bubble)的形成;原核生物转录过程中的羽毛状现象;RNA转录合成的终止机制有两种： 1．依赖Rho因子的转录终止：由终止因子(ρ因子)识别特异的终止信号，并促使RNA的释放。;ATP;2．非依赖Rho的转录终止：模板DNA链在接近转录终止点处存在相连的富