10细胞核(翟中和细胞生物学全套)要点.ppt

高分辨率的“受激发射显微镜”（Super-resolution microscopy）Imaging chromophores with undetectable fluorescence by stimulated emission microscopy要在衍射极限之外成像（比如说为了观测细胞中的微小结构），研究人员迄今为止必需依赖于用荧光发色团对成像目标进行标记，或依赖于不利用荧光、但灵敏度也要差得多的其他显微镜技术。现在，来自哈佛大学化学与化学生物学系的一个小组开发出了另外一种技术，被称为“受激发射显微镜”，它结合了以前用在其他多光子显微镜中的实验技术。该方法的灵敏度在包括无标记微管成像和用一个“chromogenic reporter”来监测lacZ基因表达的应用中得到展示。该方法的灵敏度比吸收方法高几个数量级，不受样品中其他发色团的干扰，而且适用于三维切片观测。重要的是，所有分子都是“受激发射显微镜”的潜在观测目标，所以它可用来对不发荧光的物质进行成像???测，如血红蛋白，这些物质以前用超高分辨率的显微镜无法观测。（Letter p. 1105; News Views）;第十二章 细胞核;1781年 Trontana发现于鱼类细胞； 1831年，Brown发现于植物。 大小：植物1~4μm，动物10μm。正常细胞核质比NP≈0.5，分裂期细胞NP0.5，衰老细胞NP0.5。 ;形状：圆形，胚乳 (网状）、蝶类丝腺 (分支状)。 位置：细胞中央 ，成熟植物细胞的边缘。 数目：通常一个，成熟的筛管和哺乳动物红细胞（0）、肝细胞、心肌细胞(1-2）、破骨细胞(6~50）、骨骼肌细胞(数百）、植物毡绒层细胞(2~4)。;Nucleus structure;第一节 核被膜;一、核被膜是双层膜结构;The nuclear envelope;核纤层由核纤肽构成，属IF，分A、B两型。 作用： 1．保持核的形态： 2．参与染色质和核的组装：M期核纤层被磷酸化，核膜解体。B型核纤肽与核膜残余小泡结合，A型溶于胞质。分裂末期，核纤肽去磷酸化重新组装，介导核膜重建。 ;The structure of lamin;Lamins;二、核孔是物质运输的通道 ;Cytoplasmic face cytoplasmic particles;Nuclear face basket inner complex;The Nuclear Pore;三、通过核孔的物质运输与信号序列有关;核输出信号（NES），引导RNP输出细胞核，受体为exportin。 Ran蛋白，属G蛋白，调节货物复合体的解体或形成。 蛋白输入过程参见下图：;Process of Nuclear Import;Colloidal gold labeled Nucleoplasmin were transported into nucleus.;第二节 染色体;一、染色质的化学组成;（一）DNA;THREE DNA CONFORMATIONS;主 要 特 征 ;THREE KEY REGIONS OF A CHROMOSOME;（二）组蛋白;结构：高度保守，尤其是H4。 核心组蛋白由球形部和尾部构成，球形部借Arg与磷酸二脂骨架间的静电作用使DNA分子缠绕在组蛋白核心上，形成核小体，尾部含有大量Arg和Lys，为转译后修饰的部位。 H1多样性，具有属和组织特异性。;（三）非组蛋白;二、从DNA到染色体;由H2A、H2B、H3、H4各两分子形成八聚体，构成核心颗粒； DNA分子以左手螺旋缠绕在核心颗粒表面，每圈80bp，共1.75圈，约146bp，两端被H1锁合；;;通过核小体长度压缩7倍，形成11nm纤维。 电镜下观察用温和方法分离的染色质是直径30nm的纤维，有两种解释：①由核小体螺旋化形成，每6个核小体绕一圈，长度压缩6倍；②由核小体纤维Z字形折叠而成，长度压缩40倍。;solenoid;对更高级染色体包装方式，至今尚不明确。 目前多认为30nm的纤维折叠为一系列的环（loop）结合在核骨架上（或称染色体骨架），结合点是富含AT的区域 。;Chromatin Packing;Chromatin Packing;Nucleoid spread with 2 long axes made up of bundles of fibres;Radial loops of chromatin in undisrupted chromosomes;human chromosome 2;三、异染色质和常染色质;雌性哺乳动物细胞中一条异固缩化的X染色体。 人胚胎发育16天后出现巴氏小体。;四、染色体;核仁组织区（NORs） 构成核仁，位于染色体的次缢痕区，但并非所有的次缢痕都是