毛鸡骨草体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用.docVIP

　　毛鸡骨草体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用 作者：陈晓白 韩余健 许潘健 甘耀坤 王晓平 赵仕花 【摘要】 　　目的观察毛鸡骨草在体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用。方法将毛鸡骨草醇提取液与等容量、滴度为1∶64的HBsAg和HBeAg阳性血清混合,使混合后毛鸡骨草的浓度分别为96，48，24，12和6 g/L，用磷酸缓冲液与1∶64的HBsAg和HBeAg阳性血清混合作空白对照。每组6管， 37℃水浴8 h和16 h后，采用ELISA法测定HBsAg和HBeAg的OD值，观察其对HBsAg或HBeAg的抑制作用。结果毛鸡骨草醇提取液对血清中HBsAg和HBeAg 均具有抑制作用，可使HBsAg和HBeAg的浓度降低，呈现一个明显的量效和时效反应关系。其中毛鸡骨草在作用16 h，浓度为96，48 g/L时对HBsAg，HBeAg抑制作用最为明显（P＜0.05）。结论毛鸡骨草在体外有较明显的抗HBsAg和HBeAg作用。 【关键词】 毛鸡骨草 乙型肝炎表面抗原（HBsAg） 乙型肝炎E抗原（HBeAg） 抑制 　　鸡骨草Abrus cantoniensis Hance和毛鸡骨草Abrus m ollis Hance为豆科相思子属植物,是常用的中药材，亦是我国出口中草药品种之一［1］。具有清热解毒、利湿、活血化瘀、舒肝止痛等功效，临床上多以复方入药,可用于黄疸、胁肋不舒、胃脘胀痛、急慢性肝炎、乳腺炎等症，特别是在肝胆疾病 治疗 方面应用广泛，并取得较好的效果。 中国 的广东、广西等地有丰富的鸡骨草资源，广西玉林制药有限责任公司生产的保肝护胆良药“鸡骨草胶囊”就是以毛鸡骨草为主要原料。为了更好地开发、利用广西这一丰富的中草药资源，进一步明确毛鸡骨草抗肝炎病毒的作用，为临床治疗病毒性肝炎提供更确切的理论依据，本文采用体外研究方法，以乙肝病人血清为研究对象，采用酶联免疫吸附实验(ELISA)技术，观察毛鸡骨草在体外对HBsAg和HBeAg的抑制作用。 　　 1 材料与仪器 　　1.1 药物与试剂毛鸡骨草由广西玉林制药有限责任公司提供；HBsAg检测试剂盒（酶联免疫吸附试验；ELISA），批号：200706003；HBeAg检测试剂盒（酶联免疫吸附试验；ELISA），批号：200708008。 HBsAg检测试剂盒和HBeAg检测试剂盒均为北京科卫临床诊断试剂生物技术有限公司产品。乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎病毒E抗原（HBeAg）阳性血清6份，由广西玉林市红十字会 医院 检验科提供。 　　1.2 仪器与设备RT—2100C型酶标仪（深圳雷杜生命 科学 服务公司生产）；RE-52A型旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)；Fl质量分数为0.75的乙醇在90℃水浴中回流提取3 h，取出提取液，再次用300 ml质量分数为0.75的乙醇在90℃水浴中回流提取3 h，合并提取液，用旋转蒸发仪将提取液浓缩至10 ml，使样品液浓度为3 g/ml。 　　2.2 ELISA(酶联免疫吸附实验)法定量检测HBsAg和HBeAg 参考 　　 3 结果 　　3.1 毛鸡骨草在体外对HBsAg的抑制作用采用ELISA法，检测毛鸡骨草醇提取液在作用HBsAg滴度为1：64的肝炎血清8，16 h后血清中HBsAg的含量。与空白对照组相比较，毛鸡骨草醇提取液与肝炎血清作用8，16 h后，毛鸡骨草浓度为6，12，24，48，96 g/L时均对乙型肝炎血清中HBsAg 均具有抑制作用，可使乙型肝炎血清中HBsAg的浓度降低，且随着药物浓度和作用时间的增加，其抑制作用逐渐增强，呈现一个明显的量效和时效反应关系。其中毛鸡骨草在作用16 h后、浓度为96、48 g/L对HBsAg具有较明显的抑制作用（P＜0.05），抑制率分别为35.7%，29.3%。结果见表1。 　　表1 毛鸡骨草在体外对HBsAg的抑制作用（略） 　　与空白血清组比较, *Plt;0.05；n=6 　　3.2 毛鸡骨草在体外对HBeAg的抑制作用采用ELISA法，检测毛鸡骨草醇提取液在作用HBeAg滴度为1∶64的肝炎血清8,16 h后血清中HBeAg的含量。与空白对照组相比较，毛鸡骨草醇提取液与肝炎血清作用8,16 h后，毛鸡骨草在质量浓度为6，12，24，48，96 g/L时均对乙型肝炎血清中HBeAg 具有抑制作用，可使乙型肝炎血清中HBeAg的浓度降低，且随着药物浓度和作用时间的增加，其抑制作用逐渐增强，呈现一个明显的量效和时效反应关系。其中毛鸡骨草在作用16 h，浓度为96，48 g/L对HBeAg具有较明显的抑制作用（P＜0.05），抑制率分别为35.2%，32.4%。结果见表2。 　　表2 毛鸡骨草在体外对HBeAg的抑制作用（略） 　　与