没药倍半萜成分的分离鉴定及抗肿瘤活性.docVIP

　　没药倍半萜成分的分离鉴定及抗肿瘤活性 【摘要】 目的 从没药提取物中分离纯化倍半萜单体成分，并探讨其抑制肿瘤细胞增殖的生物活性。 方法 没药石油醚提取部分经硅胶柱层析分离得到二十多个倍半萜类化合物。其中化合物1和2的结晶分别经熔点测定、薄层层析、1HNMR和13CNMR数据 分析 以及与已知化合物比较，确定其化学结构。 利用MTT法检测化合物1和2对大肠癌细胞HT29和激素非依赖型前列腺癌细胞PC3、PC3M、DU145及正常肝的永生化细胞LO2细胞增殖的 影响 。结果 经理化性质鉴定、波谱分析，确定化合物1的结构为［1(10)E,2R,4R］2甲氧基8,12环氧吉玛1(10),7,11三烯6酮；化合物2的结构为2甲氧基5乙酰基4呋喃吉玛1(10)烯6酮，二者同属没药吉玛烷型倍半萜类化合物。MTT结果表明，化合物1和2对大肠癌细胞增殖的抑制作用较弱。而对三种激素非依赖型前列腺癌细胞的增殖有非常显著的抑制作用（P＜0.01），且呈剂量依赖性。另外，化合物对正常肝永生化细胞的增殖无明显影响。结论 经分离纯化、理化性质鉴定和波谱分析，确定了没药吉玛型倍半萜化合物1和2的结构，该化合物对前列腺癌细胞的增殖有明显的抑制作用。 【关键词】 没药；吉玛烷型倍半萜；前列腺癌；细胞株 　　To determine the structures of t miphora opobalsamum, and to investigate its thEir antiproliferation effect on tumor cell gro the resinous exudates of miphora opobalsamum. The ir structures ical properties, and 1HNMR and 13Results Structures of tined as (1(10)E,2R,4R)2methoxy8, 12epoxygermacra1(10), 7, 11trien6one and 2methoxy5acetoxyfuranogermacr1(10)en6one. The results of MTT assay shooneindependent prostate cancer cell lines in a concentrationdependent manner. No significant antiproliferation activity icals at loore, less cytotoxicity of these pounds mortalizied liver normal cell line at concentrations tested. Conclusions The structure of tacrane sesquiterpenoids oneindependent prostate cancer cell groacrane Sesquiterpenoids； Prostate neplasms； Cell lines 没药（myrrh）为没药属植物树皮渗出的胶状树脂，为临床常用中药，具有行气散血、消肿止痛等功效，有悠久的药用 历史 。国内外对没药化学成分和生物活性 研究 颇为关注，已分离鉴定了300多个代谢产物，包括萜类、甾体、黄酮、木脂素等化学成分。没药中含有丰富的倍半萜成分，其骨架类型多样，已发现吉玛烷型，桉烷型，愈创木烷型等倍半萜结构120多个，并含有大量呋喃倍半萜。其倍半萜类成分具有麻醉、抗菌、抗高血糖等活性［12］。近年的研究对没药的抗肿瘤活性给予了充分肯定［35］，提出呋喃型没药倍半萜成分可下调抗凋亡基因Bcl2的表达。 本研究将miphora opobalsamum没药进行粗分，得到挥发油I、石油醚、三萜粗提物三部分，并检测粗提物对肿瘤细胞增殖的影响。结果发现其石油醚部位和三萜粗提物具有细胞毒活性。通过对有活性的石油醚部位进行成分的细分离，得到倍半萜粗提物，进一步分离得到20多个倍半萜成分，分别属于吉玛烷型、愈创木烷型等。本实验将对其中含量较高的2个吉玛烷型倍半萜化合物（sesquiterpenoid 1和2, 分别简称ST1，ST2）进行进一步抑瘤活性筛选，探讨其对癌细胞尤其是前列腺癌细胞增殖的影响，为进一步研究开发没药活性成分奠定了基础。 　　1 材料与方法 　　1.1 药材收集和鉴定 　　没药药材为2004年9月委托山东省中医药大学附属 医院 药房从印度购买。经沈阳药科大学药用植物研究室孙启时教授鉴定为爱伦堡没药，拉丁名Bal