海南黎族人群血管紧张素转换酶2基因多态性与高血压的关系.docVIP

　　海南黎族人群血管紧张素转换酶2基因多态性与高血压的关系 作者：张勇 吴恳 金水晶 周代锋 张云霞 陈少华 李林江 王镇 习隽丽 陈照清 【摘要】 目的 探讨海南黎族人群血管紧张素转换酶2(ACE2)基因多态性与高血压之间的关系。方法 应用聚合酶链反应限制性片段长度多态性检测高血压组与对照组之间的ACE2基因G8790A多态性，并推测ACE2基因多态性与高血压的发病关系。结果 高血压组与对照组比较，男性高血压组有显著性差异(Plt;0.05)，女性在基因表型及基因频率上组间比较均无统计学意义(Pgt;0.05)。结论 ACE2基因G8790A多态性位点与海南黎族男性人群高血压的发生有一定的关系。 【关键词】 原发性高血压;血管紧张素转换酶2;基因多态性 有研究表明，人类血管紧张素转换酶(ACE)基因多态性与高血压的发生相关〔1，2〕。2000年由Donoghue等〔3〕和Tipnis等〔4〕发现，ACE2的发生与ACE相反的生理活性作用，使人们对肾素血管紧张素醛固酮(RASS)系统有了新的认识。ACE2的基因多态性与心血管疾病相关性的研究已成为一个新的热点。国内外少见ACE2基因多态性与高血压关系的报道，本研究主要研究黎族人群ACE2基因多态性与高血压的关系。 　　 1 对象与方法 　　1.1 研究对象 所有入选者均为2007年3月至2009年8月海南陵水、昌江县 医院 住院及门诊的黎族患者。其中，高血压组80例，男43例，女37例，年龄43～72岁，平均(56±17.2)岁，符合1999年10月《 中国 高血压防治指南》中I、Ⅱ期高血压的诊断标准。对照组76例，男41例，女35例，年龄42～68岁，平均(58.9±10.1)岁。所有研究对象均检测血压、身高和体重。筛选标准：均为海南黎族居民，排除继发性高血压、严重肝肾功能不全患者。组间年龄、体重指数、甘油三酯水平无显著差异(Pgt;0.05)。 　　1.2 方法 　　1.2.1 血样采集 ①取空腹静脉血10 ml提取血浆和血清，在全自动生化分析仪(AUT0LAB18，北京中科富邦医疗设备有限公司)检测肝功能、肾功能、血脂、血糖;②余血5 ml加入2%乙二胺四乙酸(EDTA)或肝素抗凝管中，-70℃保存，待提取基因组DNA。 　　1.2.2 基因组DNA 提取 采用细胞裂解和血红素/蛋白沉淀技术纯化基因组DNA。将提取好的基因组DNA置于-70℃保存备用。 　　1.2.3 聚合酶链反应(PCR)扩增ACE2基因 引物设计：上游引物P1：5′TTCTCCCTGCTCCTATACTACCG3′;下游引物P2：5′TTCATTCATGTCCTTGCCCTTA3′。PCR反应条件为Touchdoin，94℃变性30 s，退火温度在起始的10个循环钟为63℃～58℃，每次递减0.5℃，反应60 s，延伸72℃ 40 s，在以后的30个循环中，退火温度固定为58℃，每次反应40 s，最后延伸7 min终止所有反应。PCR扩增产物经琼脂糖凝胶电泳检验。PCR扩增的目的片段经树脂(TM Big Dye末端标记试剂盒(PE，Foster City,CA)，以PCR引物为测序引物进行双向测序反应。针对ACE2 G8790A多态性，利用AluⅠ酶切的方法进行分型。电泳结束后取胶在凝胶成像系统中观察电泳条带并照相。对各基因型随机抽样测序核实基因型〔6～8〕。 　　1.2.4 统计学方法 应用SPSS13.0统计分析软件包进行分析。计量数据采用x±s表示。计数资料的组间比较采用t检验，率的比较采用χ2检验。 　　 2 结 果 　　2.1 ACE2基因多态性 PCR扩增产物中可见A基因型表现为500和210 bp两个片段，G基因型表现为730 bp片段，G/A杂合子表现为730、500和210 bp三个片段。ACE2基因多态性与高血压无明显相关性(Pgt;0.05)。 　　2.2 ACE2基因多态性与高血压的关系 男性中G基因频数在高血压组和对照组间差??有统计学意义(Plt;0.05);女性基因表型分布及基因频数组间无统计学差异(Pgt;0.05)，见表1，表2。表1 黎族男性高血压患者ACE2 G8790A基因分布情况表2 黎族女性各组多态性基因分型及基因频率分布情况 　　 3 讨 论 　　ACE2G8790A基因多态性与高血压关系的研究中，刘同宝等〔9〕在 中国 汉族人中发现，ACE2基因多态性与原发性高血压出现并发症有关。Craekoerelated carboxypeptidase(ACE2) converts angiotensin I to angiotensin 19〔J〕.Circ Res,2000;87(5):19. 　　4