糖基化终产物对人肾小球系膜细胞半乳糖凝集素3基因表达的影响.docVIP

　　糖基化终产物对人肾小球系膜细胞半乳糖凝集素3基因表达的影响 作者：马婵娟，孙子林，金晖，杨涛，杨益宁 ［摘要］ 　　目的： 研究 糖基化终产物（AGEs）对人肾小球系膜细胞半乳糖凝集素3 (galectin3)表达的 影响 。 方法 ：将培养的人肾小球系膜细胞(HRMC) 用不同浓度(50、100、200及400mg#12539;L-1)的AGEs干预24h或同一浓度(200mg#12539;L-1)的AGEs干预0、24、48及72h，以无血清培养基(DMEM)和相应浓度的牛血清白蛋白（BSA）为对照。用RTPCR检测细胞中半乳糖凝集素3的mRNA水平。结果：不同浓度AGEs组HRMC的半乳糖凝集素3 mRNA水平与对照组相比均有显著差异（P＜0.01），且随着AGEs浓度的增高，半乳糖凝集素3 mRNA水平也逐渐增高(P＜0.05)；AGEs干预HRMC 24、48、72h，半乳糖凝集素3 mRNA水平与对照组相比有显著差异（P＜0.05），且随着干预时间的延长，半乳糖凝集素3 mRNA水平也逐渐增高 (P＜0.01)。结论：AGEs以时间及剂量依赖的方式促进HRMC半乳糖凝集素3 mRNA的表达。 　 　［关键词］ 糖基化终产物；人肾小球系膜细胞；糖尿病肾病；半乳糖凝集素3；基因表达 　　Abstract：Objective To study the effect of advanced glycation end products(AGEs) on the expression of galectin3 in cultured human renal mesangial cells(HRMC). Methods The AGEsBSA albumin(BSA) e concentration of BSA and AGEsBSA(50,100,200,400mg#12539; L-1) for 24h or 200 mg#12539; L-1 AGEsBSA for 0,24,48 or 72h respectively. The mRNA expression of galectin3 in HRMC RNA in cells incubated g#12539; L-1AGEsBSA respectively for 24h （P＜0.01）or g#12539; L-1AGEsBSA for 0,24,48 or 72h respectively（P＜0.05）increased significantly. Moreover, e （P＜0.01）,the level of galectin3 mRNA increased. Conclusion The AGEsBSA can stimulate the expression of galectin3 in cultured HRMC in a concentration and timedependent manner. 　　Key an renal mesangial cells; diabetic nephropathy; galectin3; gene expression 　　糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)是1、2型糖尿病的慢性微血管并发症之一，是引起终末期肾病的最常见病因［1］。大量研究表明，糖基化终产物（advanced glycation end products,AGEs）在DN的发生 发展 过程中起了重要的作用［2］。AGEs致病的主要机制之一是其可以与细胞表面的AGEs受体相互作用，引发生物学效应。半乳糖凝集素3（galectin3）是AGEs的受体之一［3］，它(AGER3)与p60(AGER1)、 p90（AGER2）被认为作为一个分子复合体（AGE受体复合体）起作用。本实验 应用 体外制备的AGEs对人肾小球系膜细胞（human renal mesangial cell，HRMC）进行干预，观察HRMC半乳糖凝集素3基因表达的改变。 　　1 材料和方法 　　1.1 材料 　　牛血清白蛋白(bovine serum albumin，BSA，AMRESCO产品) ；D葡萄糖( 分析 纯，重庆北培化学试剂厂产品)；HRMC株为TSV40及Hras 原癌基因转染的永生系，保持了正常HRMC基本的形态学和生物学特性，由阮雄中博士（Renal Unit，Royal Free Hospital，LONDON，UK）惠赠；无血清培养基（DMEM）、HEPES为GIBCO公司产品；小牛血清为杭州四季青生物工程材料有限公司产品；TRIZOL、RTPCR试剂盒（RevertAidTM First S