紫外分光光度法测定长白楤木根、茎、叶中总黄酮含量.docVIP

　　紫外分光光度法测定长白楤木根、茎、叶中总黄酮含量 作者：宁德利 阮洪生 韩承伟 黄金仁 殷奎德 【摘要】 　　目的对长白楤木根、茎、叶中所含总黄酮的含量进行测定。方法采用紫外分光光度法于360 nm波长处测定。结果总黄酮在4.08～32.64 μg/ml范围内线性关系良好，其回归方程为：A=0.018 3C+0.012 7,R2=0.999 2；平均加样回收率为100.63％ (RSD=1.93％)。结论该方法简便、准确，可用于长白楤木的质量控制。 【关键词】 长白楤木； 紫外分光光度法； 总黄酮 　　Abstract：ObjectiveTo establish a method for the determination of the total flavonoids in roots, stalks and leaves of Aralia continentalis Kitagined by spectrophotometric method at 360 nm ple size shol，and the curve ethod is easy and accurate，and can be used for quality control of Aralia continentalis Kitagetric method； Total flavonoids 　　长白楤木Aralia continentalis Kitagal/g药材左右，浓缩液加2倍量水稀释，静置24 h。抽滤除去不溶性物质，滤液再次浓缩后加水至一定体积，即得长白楤木样品溶液［4］。 　　2.2 对照品溶液的制备精密称取芦丁对照品10.2 mg，置于50 ml容量瓶中，加入95%乙醇定容至刻度，超声溶解5 min，配成0.204 mg/ml标准品溶液，冷藏保存备用。 　　2.3 测定波长选择稀释到一定浓度的对照品和样品溶液分别加10%AlCl3溶液1 ml，以95%乙醇定容，摇匀，显色30 min。在200～600 nm波长范围内紫外扫描。发现360 nm处出现最大吸收波长，实验中选择测定波长为360 nm。 　　2.4 线性关系考察精密吸取芦丁标准品溶液0，0.5，1，1.5，2，2.5，3，3.5，4 ml于25 ml容量瓶中，分别加入10%AlCl3溶液1 ml，95%乙醇定溶至刻度，摇匀。显色30 min后于紫外分光光度计下测定吸收值，以吸光度为纵坐标，芦丁对照品溶液的浓度为横坐标，绘制标准曲线。结果以吸光度A对浓度C作最小二乘法回归，标准曲线方程为：A=0.018 3C+0.012 7，R2=0.999 2，线性范围为4.08～32.64 μg/ml。 　　2.5 稳定性实验取2 ml样品液于25 ml容量瓶中加10%AlCl3溶液1 ml，用95%乙醇定容至刻度，于室温条件下每隔10 min测定1次吸光值，结果发现供试品溶液放置30 min后显色完全，且在1 h内稳定，RSD=2.13%。 　　2.6 精密度实验配制一定浓度样品溶液测定吸光度，连续测定5次其RSD=1.25%，说明仪器精密度良好。 　　2.7 加样回收率实验分别精密量取已知总黄酮含量的提取溶液5份，分别加入一定量的芦丁标准品，按上述操作方法进行，用紫外法测得吸光度，得出总黄酮含量，根据回收率公式 计算 出加样回收率。结果见表1。结果表明，本方法具有良好的加样回收率。 　　表1 加样回收率实验（略） 　　2.8 样品溶液中总黄酮的含量测定按“2.2”项方法分别制备1年生、2年生、3年生、5年生根茎叶样品溶液分别取适量样品溶液于25 ml 容量瓶中加入10%AlCl3溶液1 ml，以95%乙醇定容摇匀，室温显色30min，在紫外分光光度计下测定吸光值，根据标准曲线方程计算结果见表2。 　　表2 长白楤木总黄酮含量测定结果（略） 　　表2可知随着生长时间的增加，长白楤木中总黄酮含量有所增加。其中根、茎中总黄酮含量以3年生最多，生长时间不同有所波动，叶中总黄酮含量随生长时间增长而增加，平均含量中3年生的长白楤木总黄酮含量最多。因此，长白楤木根、茎、叶最佳采收时间应为其生长3年和5年时。 　　3 结论 　　关于长白楤木成分分析的研究目前仅有关于多糖的有关报道，而关于其黄酮的含量测定一直未见报道。本文所采用的方法测定结果表明的叶中总黄酮含量最多，为开发利用黄酮类药物和保健品植物资源提供理论依据。本实验采用紫外-分光光度法测定长白楤木中总黄酮的含量，精密度、稳定性、重复性良好，加样回收率合格，为长白楤木中总黄酮的含量测定提供了一种简便可行的方法，为长白楤木的质量控制提供了评价手段。 【 参考