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血管紧张素Ⅱ对脐血CD34+细胞体外分化为巨核细胞的影响.doc
血管紧张素Ⅱ对脐血CD34+细胞体外分化为巨核细胞的影响
作者:戴兵,何吉,陈舒,刘晋辉,秦斐,朱发明,严力行
【摘要】 为了探讨血管紧张素Ⅱ对脐血CD34+细胞诱导分化为巨核细胞的 影响 ,采用免疫磁珠法(MACS)分选8例健康产妇足月顺产胎儿脐血中的CD34+细胞,在含血小板生成素(TPO 50 ng/ml)、白介素-3(IL-3 10 ng/ml)、干细胞刺激因子(SCF 50 ng/ml)的无血清培养液中添加浓度分别为50、100、1 000 μg/ml的血管紧张素Ⅱ作为实验组;同时以未添加血管紧张素Ⅱ的基础培养液作为对照组,培养14天后观察结果。细胞计数仪计数单个核细胞数(MNC);流式细胞仪计数培养体系中的CD41+细胞数、血小板数,及 分析 细胞周期;利用CD41单克隆抗体免疫荧光染色观察培养体系中的细胞情况。结果表明: 与对照组比较,实验组单个核细胞数无明显改变(Pgt;0.05);而CD41+细胞和血小板数量有明显的增加(Plt;0.05);细胞周期分析显示,实验组的4倍体细胞增加,并存在明显的凋亡(Plt;0.05);荧光显微镜下观察对照组和实验组均可见大小不一的CD41+细胞。结论: 血管紧张素Ⅱ可以促进脐血中CD34+细胞诱导分化为巨核细胞,并能促进巨核细胞产生血小板。
【关键词】 血管紧张素Ⅱ;CD34+细胞;巨核细胞;脐血
Effect of Angiotensin Ⅱ on Differentiation of Umbilical Cord Blood CD34+ Cells into Megakaryocytes
Abstract This study ed to investigate the effect of angiotensin Ⅱon differentiation of cord blood CD34+ cells into megakaryocytes in vitro. The CD34+ cells from Eight fresh umbilical cord blood samples sorted by a high-gradient magic cell sorting system (MACS) -free culture medium containing thrombopoietin (TPO) 50 ng/ml,IL-3 10 ng/ml,stem cell factor (SCF) 50 ng/ml and different concentrations of angiotensinⅡ(0,50,100,1000 μg/ml) for 14 days. Mononuclear cells (MNC) atic cell analyzer. Cultured CD41+ cell and platelet counts in cultured system,and cell cycle etry. CD41 specific monoclonal antibody staining munofluorescence microscopy. The results shober of MNC not increased significantly(Pgt;0.05),but the number of CD41+ cells and platelets increased significantly in treatment group (Plt;0.05). Cell cycle analysis revealed that the amounts of 4N cells increased and apoptosis cells obviously existed in treatment group (Plt;0.05). After fluorescence staining,more CD41+ cells of different sizes eans of fluorescence microscopy in both groups. It is concluded that angiotensinⅡ can induce the cord blood CD34+ cells to differentiate toegakaryocyte,and enhance the function of megakaryocyte to produce platelet.
Key egakaryocyte; umbilical cord blood
血管紧张素Ⅱ(angiotensinⅡ,AngⅡ)是肾素血管紧张素系统的一种
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