【2017年整理】红花油 实验构思.docVIP

红花油相关实验研究 草稿（整理） 导师让整理个方案朋友们给些意见 哈 实验思路1、黄酮含量的测定回归方程?x 测定值 冷 1.293 1.268 1.159 1.240 0.073 1.24 热 1.347 1.261 1.37 1.328 0.059 1.33 索氏提取 1.141 1.254 1.074 1.157 0.091 1.16 2、多酚含量的测定 3、甾醇含量的测定 硫磷铁法测总甾醇含量采用硫磷铁法检测中总甾醇含量 2.5 mol/L KOH乙醇溶液的配制将14.0 g氢氧化钾溶解在10 mL水中冷却至室温后用乙醇稀释至100 mL 标准胆固醇对照溶液的配制用乙醇配制成075,100,125,150,175 mg/L等6个不同质量浓度的胆固醇溶液 磷硫铁显色剂的配制精密称取2.5 g三氯化铁溶于85 磷酸并用浓磷酸定容至100 mL 储存于棕色瓶中即为铁储存液冷藏可长期储存取上述铁储存液1.5 mL于棕色瓶中用浓硫酸定容至10 mL 室温下可储存6~8周 分别向上述6个标准胆固醇溶液加入磷硫铁显色剂2 mL 摇匀冷却至室温在480 nm处测定吸光值得标准曲线取4 mL 甾醇样品B于试管加入磷硫铁显色剂2 mL 摇匀冷却至室温在480 nm处测吸光值计算其中甾醇的含量试验进行3次重复 2GC-MS法 1).样品制备称取0.1g的油于试管中,加入1ml 1M 乙醇-氢氧化钠溶液,密封,摇晃20s,70°C下60min,每10min晃动一下,冷却至室温,然后加入1ml纯水,5ml正己烷,密封,大力摇晃3min,然后分离清液层(正己烷层),水层用5ml正己烷分离3次,收集正己烷溶液,加入1g的无水硫酸钠,旋蒸浓缩,得到样品 (2).GC-MS:180°C 15°C/min 280°C 25min,样品入口温度为250°C，探测器温度为280°C.进样量1μl，氮气流量为1ml/min 离子源:EI源;电子能量:70ev;分子量扫描范围:40-550amu。 红花油处理工艺 毛油→预处理→脱胶→脱色→脱酸→脱色→脱臭→成品油 沉淀物为粗磷脂油脚 毛油→真空抽滤→预热80℃→ 加水/7％盐水→搅拌（保温）→ （保温）离心→上清液即脱胶油 可采用活性白土和活性炭进行脱色， 脱色后的脱色油以正己烷作参比 采用真空蒸汽脱臭法 真空蒸汽脱臭法是在脱臭锅内用过热蒸汽（真空条件下）将油内呈味物质除去的工艺过程。 脱胶1%、5%、10%、15%、20%。 2用蒸馏水配制7mmol/L的ABTS溶液和140mmol/L的过硫酸钾溶液,分别取20mLABTS溶液和352μL过硫酸钾溶液混合,在室温下暗处静置12~16h后,用无水乙醇将混合液稀释至OD734=0.700+_0.020时得到ABTS+自由基工作液,标准溶液的配制:用无水乙醇配制Trolox溶液浓度分别为20,40,60,80,100,120μmol/L. 3取新制备的ABTS+工作液3mL，分别与不同浓度的或Trolox样品1mL混匀，在室温下反应30min后，测定OD734，以不加的试样为空白，按下列公式计算样品对ABTS+ 自由基的清除率：ABTS+ 清除率=（1-A样品/A空白）100 以Trolox浓度为横坐标，不同浓度的Trolox对ABTS+ 的清除率为纵坐标，绘制标准曲线通过计算得到的样品液的清除率，在标准曲线上找出其相对应的Trolox浓度，换算成Trolox当量浓度（mol/L），即TEAC（Trolox equivalent antioxidant capacity）值 清除率（%）=（A536处理-A536对照）/ （A536空白对照-A536对照）*100 DPPH清除率的测定[12-13] 称取一定量的 ，分别用无水乙醇配成浓度为5、10、20、40、60、80、100mg/mL，取2mL样品溶液，加入2mL 0.2mmol/mL的DPPH溶液，摇匀，于25 ℃水浴中加热15min后，以无水乙醇调零，测定517nm处的吸光值Ai；取2mL无水乙醇代替样品溶液测得空白吸光度A0；以2mL样品溶液中加入2mL无水乙醇，测得样品本体吸光度Aj同一测定重复3次，取平均值按下式计算清除率： 清除率（%）=[A0-（Ai-Aj ）/A0] *100 Fe3+还原实验 配制浓度为0．03mol/L的铁氰化钾溶液和pH为6．6的磷酸盐缓冲溶液样品组:1mL样品+1.25mL缓冲液+1.25mL铁氰化钾溶液，记为AS;对照组:1mL甲醇+1.25mL缓冲液+1.