二对半e抗原假阳性原因分析.docVIP

　　二对半e抗原假阳性原因分析 【摘要】 目的：探讨导致二对半e抗原假阳性的原因。 方法 ：用ELISA法测定45份离心与不离心抗凝标本的HBeAg。结果：不离心标本的HBeAg单独阳性很高，离心标本基本无此情况。结论：假阳性与不离心有关，全血中有许多与HBeAg有共同抗原颗粒物质，在酶免过程中出现非特异性结合，而造成假阳性，洗板不清，可能也是造成假阳性的原因之一。故要求对单HBeAg阳性标本进行离心，以提高测定结果的准确性。 【关键词】 HBeAg；ELISA;假阳性 【ABSTRACT】 Objective:To investigate the reason of causing e-antigen false positive.Methods:Use ELISA method to measure HBeAg of 45 centrifuge and centrifugeless uncoagulate samples .Results : The percentage of the single positive for HBeAg is high in the centrifugeless samples.But the result is quite different for centrifuge samples.Conclusion:The false positve has something to do atters that have mon antigen function atic method there are unspecial binations, ple to improve the accuracy of measuring results. 【KEY odel 550酶标仪,BIORAD Model 1575洗板机，北京医用离心机厂LDZ5—2型离心机,美国PE公司PE480 DNA扩增仪。 1.2 标本 枸橼酸抗凝标本。 1.3 试剂 科华公司和华美公司HBeAg试剂盒，新创HDVIgM试剂盒,HBVDNA试剂盒。 1.4 方法 严格按照试剂盒说明书操作。 1.4.1 枸橼酸抗凝标本45份混匀不离心和3000离心5min、10min，分别用科华和华美试剂同时进行检测。 1.4.2 结果判断样品OD值/阴性对照，OD值＞2.1为阳性，否则为阴性。 1.4.3 45例标本作HDVIgM检测，同时作HBVDNA检测。 2 结果 表1 45份枸橼酸抗凝标本两种试剂离心与不离心检测结果 2.1 对45例标本作HDVIgM检测，结果为阴性。 2.2 对45例标本作HBVDNA检测，结果为阴性。 3 讨论 3.1 HDV是缺陷病毒，当HDV和HBV重叠感染,HBV为HDV复制提供HBsAg[3],故能表现HBsAg阴性而HBeAg阳性的情况。通过对HDVIgM测定结果表明，单独HBeAg阳性与HDV重叠感染无关。 3.2 HBeAg存在于乙肝病毒Danna颗粒的核心部分，HBeAg存在表明HBV处于增殖和复制状态，具有强烈的传染性。通过对HBVDNA的检测结果为阴性，表明体内并无HBVDNA[4]，故我们认为出现的HBeAg为假阳性。 3.3 HBeAg是前C区基因区表达，同时HBcAg在C区基因区表达[5]，HBeAg的纯化是产生纯抗-HBe的前提，故在包被过程所用抗—HBe不纯可能是造成假阳性的原因之一。 3.4 全血中有许多HBeAg的共同抗原类的颗粒物质，在不离心的情况下悬浮在血浆中，故在酶免过程中出现非特异性结合而造成假阳性［6］；另外可能血中存在许多SOD酶，在洗涤过程中不清而在显色过程中出现非特异性反应造成假阳性，同行也有类似报道[7]。 3.5 HBeAg阳性是反应HBV增殖、有传染性的一种有意义的指标之一，在排除HBsAg勾带反应，HDVIgM阳性，HBVDNA阳性情况下，单独出现这样的结果需慎重报告。 3.6 血清中的细胞成分中含有过氧化酶成分，产生辣根过氧化物酶样作用，当离心不充分的血清、血浆标本加养于反应板孔时，细胞成分粘附于酶标板而不能洗去，会产生酶促反应而呈现阳性显色，导致出现一些假阳性［8］。 【 参考