现代分子生物学黑板思考题520.docxVIP

博学慎思、明辨笃行 陈亮制作于2013/5/8 PAGE \* MERGEFORMAT10 分子生物学思考题及参考答案 绪论 1、什么是基因组？什么是蛋白质组？请具体分析两者的特点以及两者之间的关系。 答：基因组（Genome），一般的定义是单倍体细胞中的全套染色体为一个基因组，或是单倍体细胞中的全部基因为一个基因组。可是基因组测序的结果发现基因编码序列只占整个基因组序列的很小一部分。因此，基因组应该指单倍体细胞中包括编码序列和非编码序列在内的全部 DNA 分子。具体讲，核基因组是单倍体细胞核内的全部 DNA 分子；线粒体基因组则是一个线粒体所包含的全部 DNA 分子；叶绿体基因组则是一个叶绿体所包含的全部 DNA 分子。 蛋白质组(Proteome)提出，指由一个细胞或组织的基因组所表达的所有蛋白质. 蛋白质组的概念与基因组的概念有许多差别，它随着组织、甚至环境状态的不同而改变.在转录时，一个基因可以多种 mRNA 形式剪接，并且同一蛋白可能以许多形式进行翻译后的修饰. 因此，一个蛋白质组不是一个基因组的直接产物，蛋白质组中蛋白质的数目有时可以超过基因组的数目。 第二章 核酸的结构与功能 1、维持或影响双螺旋结构的稳定因素。P2 ①氢键作用，弱键加热解链 ②磷酸二酯键，强键，需要酶降解 ③静电斥力，在一定离子强度下可以削弱如0.2mol/l的氯化钠溶液 ④碱基堆积力 包括范德华力，疏水作用力2、DNA结构多样性及原因。 DNA结构多样性及原因。 答：脱氧核苷酸的含氮碱基的不同,碱基对的排列顺序不同,碱基的数目不同。 DNA二级结构的多态性：除B型DNA外，还发现了A型DNA和Z型DNA，这一现象称为DNA的多态性；产生的原因在于多核苷酸链的骨架含有许多可以转动的单链，从而可以使糖环采取不同的构象。 3、十字架结构形成的原因。 答：在双链DNA中，如果两条互补的链分开，每条链上的互补序列就有机会发生碱基互补配对形成发夹结构（对单练而言），两个相对的发夹结构形成了十字架构型（对双链而言）。凡有回文结构的DNA分子，由于同一条链内有互补序列，因此在单链DNA或者RNA中能形成发夹结构??而在双链DNA分子内形成十字架结构。 4、什么是miRNA，有什么作用？ 答：是在 HYPERLINK /view/77362.htm 真核生物中发现的一类内源性的具有调控功能的非编码RNA，其大小长约20~25个核苷酸。作用：成熟的miRNAs是由较长的 HYPERLINK /view/3852166.htm 初级转录物经过一系列核酸酶的剪切加工而产生的，随后组装进RNA诱导的沉默复合体，通过碱基互补配对的方式识别靶mRNA，并根据互补程度的不同指导沉默复合体降解靶mRNA或者阻遏靶mRNA的翻译。 5、核酸变性的表观性状。 答：溶液粘度降低、沉降速度增大、浮力密度加大、光吸收值升高（A260nm）即增色效应 6、DNA复性的条件，如何实现复性？ 答：与DNA的浓度，溶液的温度和离子强度有关。DNA的复性速度受多种因素的影响。一般复杂的DNA序列比简单的序列复性的时间更长，大的DNA片段比小的DNA片段复性花的时间长。。此外，温度也是一个因素，低温减少分子碰撞的机会，所以复性温度不宜过低，一般比熔点低，20-25℃比较合适。离子强度也影响复性，常用的盐浓度是0.15到0.5mol/l的NaCl。 7、如何测定DNA复性与否，方法？ 答：①测定显色效应，在复性过程中可跟踪测定A260的吸光值； ②测定S1核酸酶水解DNA的量，S1核酸酶只催化单链DNA水解，不能作用于双链DNA因此将样品限定水解后测定S1核酸酶谁接的DNA的量。 ③羟基磷回石柱层析，羟基磷灰石是一种磷酸钙盐，经过一定的处理后，其具有吸附DNA的能力，洗脱时只允许单链通过，从而可以计算出双链DNA的量。 8、简述真核生物染色体的组成及组装过程 真核生物染色体除了性细胞外全是二倍体 ，DNA以及大量蛋白质及核膜构成的核小体是染色体结构的最基本单位。核小体的核心是由4种组蛋白（H2A、H2B、H3和H4）构成的扁球状8聚体。 蛋白质包括组蛋白与非组蛋白。组蛋白是染色体的结构蛋白，它与DNA组成核小体，含有大量赖氨酸核精氨酸。非组蛋白包括酶类与细胞分裂有关的蛋白等，他们也有可能是染色体的结构成分 由DNA和组蛋白组成的染色体纤维细丝是许多核小体连成的念珠状结构。 1.由DNA与组蛋白包装成核小体，在组蛋白H1的介导下核小体彼此连接形成直径约10nm的核小体串珠结构，这是染色质包装的一级结构。 2.在有组蛋白H1存在的情