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.绿色荧光蛋白

绿色荧光蛋白 2008年诺贝尔化学奖 获得者:马丁·查尔菲(Martin Chalfie)、钱永健(Roger Y. Tsien)和下村修(Osamu Shimomura) 小组成员:张艳嫡 邱丹丹 郎平 肖欢 颜旭 张忠丽 黄春林 刘凯 郭高尚 曾万强 绿色荧光蛋白(green fluorescence protein; GFP) 定义:从水母体内发现的发光蛋白。分子质量为26kDa,由238个氨基酸构成,第65~67位氨基酸(Ser-Tyr-Gly)形成发光团,是主要发光的位置。其发光团的形成不具物种专一性,发出荧光稳定,且不需依赖任何辅因子或其他基质而发光。 诺贝尔奖获得者 2008年10月8日,日本科学家下村修(伍兹霍尔海洋生物学研究所)、美国科学家马丁·查尔菲(哥伦比亚大学)和钱永健(加利福尼亚大学圣迭戈分校)因为发现和改造绿色荧光蛋白而获得了当年(2008)的诺贝尔化学奖。 绿色荧光蛋白分子的形状呈圆柱形,就像一个桶,负责发光的基团位于桶中央。装在“桶”中的发光基团对蓝色光照特别敏感。当它受到蓝光照射时,会吸收蓝光的部分能量,然后发射出绿色的荧光 。 特性决定广泛用途 GFP是无毒的,它可在不同的有机体中,高水平地予以表达,而对有机体的生理学则仅有很小的影响.可用于在时间和空间上监视越来越多的活细胞中的现象和机制,如基因表达、蛋白质的定位和动态学等.因此可以说,绿色荧光蛋白质的发现是联系到生物科学上的一次技术革命. 荧光蛋白的应用 细胞分裂和骨架 细胞器动力学和泡囊运输 发育生物学 分子标记 药物筛选 光伏发电 细胞分裂和骨架 GFP较小,与其它蛋白质融合后不影响自身的发光性能,利用这一特性可以加深我们对细胞内一些过程的了解,如细胞分裂、染色体复制和分裂,发育和信号转导等 。 如研究脑神经细胞的发展或者癌症细胞是如何扩散的等。 用绿色荧光蛋白标记相应的细胞成分(微管蛋白、微丝、中间纤维)可以观察到组成细胞骨架的微管和微丝,可以加深我们对细胞支持系统的了解。 细胞器动力学和泡囊运输 利用基因重组原理和荧光蛋白的特性,可以方便的研究细胞内蛋白质的合成部位及转运过程,如区分线粒体和细胞核的合成程序。 发育生物学 GFP作为活体标记物,可用于示踪细胞发育过程中基因表达的变化情况,对于那些透明的动物,还可观察其发育过程。 分子标记 利用绿色荧光蛋白独特的发光机制,可将GFP作为蛋白质标签(protein tagging),即利用DNA重 组技术,转染合适的细胞进行表达,然后借助荧光显微镜便可对标记的蛋白质进行观察。   药物筛选 由于GFP分子量小,在活细胞内可溶且对细胞毒性较小,因而常用作荧光探针。 将一荧光蛋白与信号分子相偶联,根据荧光蛋白的分布情况即可推断信号分子的迁移状况,并推断该分子在迁移中的功能。利用这一原理,已经成功构建了一个筛选模型,用于研究药物介导的糖皮质激素受体(hGR)的迁移过程。 光伏发电与生物照明 瑞典研究人员利用有高超光伏转化能力的水母,开发出提升收获太阳能的技术。利用水母身上提取的GFP,该小组制作的装置可用这些“黏黏绿”将紫外光转化为自由电子。 总之,使用这些荧光蛋白,科学家们就好像在细胞内装上了“摄像头”,得以实时监测各种病毒“为非作歹”的过程。通过沙尔菲的基因克隆思路,科学家们还培育出了荧光老鼠和荧光兔。 随着病毒在宿主体内不断扩散,你就可以通过跟踪发出的绿光来观察病毒的扩散途径;或者你把它接合到一种蛋白质上并通过显微镜观察它在细胞内部的移动 * * 美丽的水母图 用绿色荧光蛋白标记的细胞 线粒体中表达的GFP ?????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????????? 科学使用绿色荧光蛋白跟踪大脑细胞的活动 拥有绿色荧光蛋白的蜜蜂 1997年7月日本大阪大学的科研人员首次培育出能够夜里发光的含有绿色荧光蛋白的老鼠 含有绿色荧光蛋白的兔子

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