2015-2016年人教版选修三专题2第2节二动物细胞融合与单克隆抗体课件（23张）.ppt

该实验证明：细胞膜的流动性 动物细胞融合与单克隆抗体 植物体细胞杂交 植物细胞A 植物细胞B 原生质体A 原生质体B 原生质 体融合 杂种细胞（生壁） 组织培养（脱分化-愈伤组织-再分化） 杂种植株 去细胞壁 纤维素酶、果胶酶 化学法 物理法 动物细胞与植物细胞的差别： 无细胞壁 全能性受限制，不能发育成杂种动物 动物细胞杂交与植物细胞杂交的不同： 不需去除细胞壁 不能发育成新的动物个体 一、动物细胞融合（细胞杂交） 1、概念： 指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。 2、结果： 形成单核的杂交细胞 3、原理： 细胞膜的流动性 4、诱导方式 物理法：离心、振动、电激 化学法：聚乙二醇（PEG) 生物法：灭活的病毒（例如：仙台病毒） 为什么灭活的病毒能作为诱导剂？ 因为灭活的病毒能使细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合。 不灭活的病毒能作为诱导剂吗？ 不能，因为不灭活的病毒会感染细胞，而不能诱导细胞融合。 5、过程： 动物细胞A 动物细胞B 诱导，融合 完整的杂交细胞AB 有丝分裂 （膜融合、质融合） （核融合） 注意：动物细胞的融合也需要把多个两种细胞放在一起，让它们随机融合后，再从中筛选杂交细胞 6、意义：突破了有性杂交方法的局限，使远缘杂交（种间、属间、科间、动植物之间）成为可能。 7、应用：成为研究细胞遗传、细胞免疫、肿瘤和生物新品种培育等的重要手段 特别是利用杂交瘤技术制造单克隆抗体 已成功的动物细胞融合实例还有哪些？ 生物种类 成功年代 酵母菌—鸡 1975年 人—胡萝卜 1976年 人—小鼠 1978年 形成杂种细胞 获得杂种植株 结果 物理、化学方法 （同左） 灭活的病毒 物理（离心、振荡、电刺激） 化学（聚乙二醇） 诱导方法 细胞膜的流动性 细胞膜的流动性、 植物细胞全能性 原 理 动物细胞融合 植物体细胞杂交 比较项目 1、植物、动物细胞融合的比较 课堂小结 融合前处理 用纤维素酶、 果胶酶去壁 用胰蛋白酶 使细胞分散 2、什么是抗体？ 二、单克隆抗体 回顾 3、抗体的分布？ 抗体是机体受抗原刺激后产生的、并能与该抗原发生特异性结合的具有免疫功能的球蛋白。 主要分布在血清中。 1、什么是克隆？ “克隆”从英文“clone”音译而来，是指从一个共同祖先，通过无性繁殖的方法产生出来的一群遗传特性相同的DNA分子，细胞或个体。在细胞水平指动物细胞培养. 该法制备抗体的特点： 产量低、纯度低， 且抗体的特异性差、灵敏度低。 抗体的传统生产方法及缺陷是什么？ 思 考：如何获取某种特定抗体？ B淋巴细胞特点 ３．每一个B淋巴细胞只能产生一种抗体。 １．B淋巴细胞受抗原刺激后，可以 产生抗体。 ２．动物体内的B淋巴细胞可以产生百万种以上的抗体，每种抗体对特定的抗原具有特异性免疫作用。 二、单克隆抗体 由单个B淋巴细胞经过无性繁殖（克隆），形成基因型相同的细胞群，这一细胞群所产生的化学性质单一、特异性强的抗体 称为单克隆抗体。 1、概念: 怎样才能大量生产单克隆抗体？ 提示1：仅用细胞培养技术可行吗？ 提示2：我们所学的哪种细胞是可以无限增殖的？ 提示3：有什么方法能使B细胞产生抗体的能 力和肿瘤细胞无限增殖能力同时具备呢？ 大量生产单克隆抗体思路 B淋巴细胞具产生抗体的功能 骨髓瘤细胞具无限增殖的特性 利用细胞融合的技术将两种细胞融合获得具有淋巴细胞和骨髓瘤细胞特性的杂交瘤细胞 利用动物细胞培养技术大量培养杂交瘤细胞 B淋巴细胞 注射特定抗原蛋白 骨髓瘤细胞 培养骨髓瘤细胞 融合 （只考虑两两融合）培养液中细胞有几种类型？融合细胞几种类型？ 骨髓瘤细胞---骨髓瘤细胞 B淋巴细胞--- B淋巴细胞 B淋巴细胞---骨髓瘤细胞 多种杂交细胞 在具有筛选作用的培养基上培养 专一抗体检验阳性 克隆上述杂交细胞 分开不同杂交细胞，克隆专一抗体， 检验阳性细胞 单克隆抗体 注射到小鼠体内 体外培养 2、单克隆抗体的制备过程 第1次筛选目的：得到杂交瘤细胞（多种）。 第2次筛选目的：在杂交瘤细胞中筛选出能产生所需抗体的杂交瘤细胞。 该细胞继承双亲细胞的遗传特性，既能产生专一抗体又能无限增殖。 杂交瘤细胞有何特点？ 特异性强，灵敏度高 免疫小鼠 培养骨髓瘤细胞 融