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第六节 军团菌属 * 分类 军团菌属(Legionella) 属于军团菌科（Legionellaceae） 常见的与人类疾病有关的军团菌： 嗜肺军团菌（Legionella pneumophila） 米克戴德军团菌（L. micdadei） 长滩军团菌（L. longbeachae） 杜莫夫军团菌（L. dumoffii） 波兹曼军团菌（L. bozemanii） * 临床意义 引起肺炎型和非肺炎型(庞蒂亚克热Pontiac fever)感染 肺炎型：多器官损害，肺部、消化道及神经系统症 状及体征，致死率高 医院感染可高达23% 慢性心、肺、肾病变、艾滋病或接受免疫抑制剂者 易发本病，且死亡率高达45% * 临床意义 空气－乳胶微粒传播 发病机制：①内毒素和细胞产生的多种酶 ②裂解红细胞 ③消化卵黄囊 * 生物学特性 革兰阴性杆菌 菌体呈线状 无芽胞，无荚膜，有端 鞭毛或侧鞭毛 严格需氧 触酶阳性 可液化明胶 不分解糖类 部份菌株氧化酶阳性 * 微生物检验 临床标本：痰、气管分泌物、胸水和血液为主。 病理组织标本：必须制成悬液，再进行涂片和分离培养。 环境污染标本：应先浓缩再接种。 * 微生物检验 分离培养： 营养要求苛刻，生长缓慢 生长温度为35℃ 最适pH6.7~7.0 初次分离必须采用(BCYE) 3~5天可形成1~2mm直径的光泽菌落 * 核酸检测：是快速特异的方法，采用DNA探针及PCR扩增rRNA的方法均可用于军团菌的快速诊断 抗体检测：是检测军团菌感染临床常用手段，常采用方法：IFA、MAA、TAT、ELISA法等 * 军 团 菌 感 染 诊 断 试 验 试验 敏感性(%) 特异性(%) 评注 培养 70 100 参考方法 直接免疫荧光 25～70 95 不推荐常规应用 间接免疫荧光 70～90 99 只用于嗜肺军团菌血清群1 酶标记免疫 70～90 99 乳胶凝集 55～90 85～99 血清学（间接免疫荧光） 70～80 95 辅助培养 * 非发酵菌 嗜麦芽窄食单胞菌 葡萄糖产酸 无色杆菌属 土壤杆菌属 假单胞菌属 动力 + OX OX － 不动杆菌属 + 葡萄糖产酸 黄色素 摩拉氏菌属 黄杆菌属 － － － + + 端鞭毛 － + － + + 产碱杆菌属 尿素 － + 常见不发酵菌的鉴定双岐索引 * 42℃ 生长 明胶 液化 　鞭 　毛 + + 极单鞭毛···铜绿假单胞菌 - + 极多鞭毛···荧光假单胞菌 - - 极多鞭毛···恶臭假单胞菌 OF试验：O 氧化酶：+ 精氨酸水解：+ 葡萄糖酸氧化：+ 　　　　氮气：+ 医院环境及用品、临床标本 分离培养基 涂片检查 肉汤培养基 血琼脂平板 SS、麦康凯琼脂平板 挑选可疑菌落（37℃ 培养18－24h观察 有无色素产生，色素鉴别接种金氏　A、B培养基） 无色素菌株 -42℃ + 绿脓素+ 绿脓菌荧光素 铜绿假单胞菌 假单胞菌鉴定程序 * 1.肉浸汤 2.胰化酪蛋白 　大豆肉汤 37℃ 培养18－24h 　挑选菌落鉴定 分型 血清学 噬菌体 绿脓素 　　　　初步鉴定 菌落特征、色素、绿脓素：+ 涂片、革兰染色、氧化酶：+ 最后鉴定 生化反应 脑脊液、胸（腹）水、脓液、分泌物、痰、尿液、十二指肠引流液 血液、环境用品 分离培养： 直接涂片革兰染色 粪便 血琼脂平板 SS、麦康凯 分离培养： 37 ℃ 如生长 铜绿假单胞菌检验程序 * 脓汁、分泌物、尿液 脑脊液、血液 直接涂片 革兰染色 分离培养 血液琼脂平板 麦康凯琼脂平板 增菌培养 挑选可疑菌落 最后鉴定 生化反应 初步鉴定 KIA：底层、斜面不变 氧化酶 硝酸盐还原 动力 35 ℃－37 ℃ 18h-24h 不动杆菌属检验程序 * 耐药机制： ①产酶：金属酶，OXA酶 ②外膜蛋白的改变（Outer membrane proteins，OMP）为主要机制 ③主动泵出机制：对喹诺酮类，　 　　MexA-MexB-OprM及MecC-MexD-Oprj ④整合子：1类，3类 铜绿假单胞菌（P. aeruginosa) * 三、马勒伯克霍尔德菌与伪马勒伯克霍尔德菌 属于rRNA第II群 鼻疽病与类鼻疽病的病原体 2004年NCCLs称为可能成为生物恐怖的细菌 * 马勒伯克霍尔德菌与伪马勒伯克霍尔德菌 两菌均人兽共患病原菌 人类感染是经伤口、粘膜、呼吸道 急性患者可有高热、衰竭等全身症状 肺鼻疽病 、皮肤鼻疽病、内