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2016-2017学年度人教版选修1DNA的粗提取与鉴定课件(17张).ppt
* 5.1 DNA的粗提取 和鉴定 学习目标 1、通过尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取,了解DNA的物理化学性质。 2、理解DNA粗提取与鉴定的原理。 活动一、了解提取DNA的方法 阅读课本P54-55相关内容,自学基础知识。小组合作学习,分析回答以下问题。 1、DNA粗提取的原理是什么? 2、DNA鉴定的原理是什么? 通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出DNA,可以从细胞中提取和提纯DNA;再利用酒精进一步将DNA与蛋白质分离开来,达到提纯的目的。 在沸水浴条件下,DNA遇二苯胺呈现蓝色。 ①根据DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图,思考在什么浓度下,DNA的溶解度最小? DNA在NaCl溶液中的溶解度是如何变化的? DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线图 在NaCl溶液浓度低于0.14 mol/L时,DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而逐渐降低;在0.14 mol/L时,DNA溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时,DNA的溶解度又逐渐增大。 ②如何通过控制NaCl溶液的浓度使DNA在盐溶液中溶解或析出? 当氯化钠的物质的量浓度为 2 mol/L时,DNA的溶解度最大,浓度为 0.14 mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使DNA在盐溶液中溶解或析出。 活动二、尝试对植物或动物组织中的DNA进行粗提取与鉴定。 阅读课本P55-56相关内容,通过小组合作,分析下列问题。 (一)实验材料的选取 你认为教材提供的材料中哪些不适合提取DNA? 哺乳动物的红细胞和液体培养基中的大肠杆菌。 实验过程 观看实验视频, 注意观察和思考! (二)破碎细胞,获取含DNA的滤液 1、若选用鸡血和洋葱作实验材料,则怎样获取含DNA的滤液? 2、在以上实验中,加入蒸馏水、洗涤剂和食盐的作用分别是什么?过滤时应当选用(滤纸、尼龙布)? 3、在处理植物组织时需要进行研磨,其目的是什么?研磨不充分产生什么结果? 在鸡血细胞液中加入一定量蒸馏水并用玻棒搅拌,过滤后收集滤液;切碎洋葱,加入一定量洗涤剂和食盐,搅拌研磨,过滤后收集滤液。 血细胞在蒸馏水中大量吸水而涨裂;洗涤剂瓦解细胞膜;食盐溶解DNA物质;选用尼龙布进行过滤。 破碎细胞壁,使核物质容易溶解在NaCl溶液中;研磨不充分会使DNA的提取量减少。 4、最初获得的DNA滤液含有蛋白质、脂质等杂质,需要进一步提纯DNA。阅读教材提供的三种方法,分析其中的原理。 (三)去除滤液中的杂质 方案一的原理:DNA在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同; 方案二的原理:蛋白酶分解蛋白质,不分解DNA; 方案三的原理:蛋白质和DNA的变性温度不同。 (四)DNA的析出与鉴定 5、在滤液中仍然含有一些杂质,怎样除去这些杂质呢?得到的DNA呈何颜色? 滤液与等体积的冷却酒精混合均匀,静置2~3分钟,析出的白色丝状物就是DNA。DNA呈白色。 6、怎样鉴定析出的白色丝状物就是DNA呢?简述DNA的鉴定过程。 具体做法。试管2支,编号甲乙→各加等量5mLNaCl溶液→甲中放入少量白色丝状物,使之溶解→各加4mL二苯胺,混合均匀→沸水浴5min→观察颜色变化 活动三、讨论实验成功的关键及注意事项 阅读课本P56-57相关内容,小组合作讨论实验成功的关键及注意事项。 参考练习册P35,知识点二 *
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