吐温80对黄连中小檗碱提取率的研究.docVIP

　　吐温80对黄连中小檗碱提取率的研究 【摘要】 　　目的 研究吐温80对黄连中小檗碱提取率的影响。方法综合考虑吐温80用量，H2SO4浓度，H2SO4用量三方面因素，按照正交实验设计的要求确定最佳的提取条件。结果吐温80固液比为2∶3，H2SO4浓度为0.2 % ，H2SO4固液比为1∶35时黄连中盐酸小檗碱的提取率最高 。结论吐温80可促进黄连中小檗碱提取率的增加。 【关键词】 吐温80; 黄连; 小檗碱.L.编辑。 　　Abstract:Objective To study the including effect of polysorbate-80 on extraction of berberine from Coptis chinensis. MethodsOrthogonal experiment design ize excraction conditions.Three factors,including the content of polysorbate80， concentration of sulfuric acid, content of sulfuric acid ,um conditions of extraction ote the extracting rate of berberine from coptis chinensis. 　　Key 80）；是一种非离子亲水性的表面活性剂，淡黄色粘稠状液体；微有脂肪臭，味微苦。易溶于水、乙醇、氯仿、乙醚，不溶于液状石蜡。应用广泛，除作乳化剂外，也用作某些水中难溶药物的增溶剂，物理吸附于脂质双面表层，其聚氧乙烯基从脂质双层中伸出，致密覆盖在双层表面，形成有一定厚度的亲水相，对植物粉末产生润湿作用，对不同分子结构的难溶物质增溶作用不同，降低提取溶剂乙醇的体积分数，降低提取成本，因此用吐温80作为药物的增溶剂有较高的实用价值［2］。 　　1 材料与仪器 黄连，购自于沈阳东北大药房，经沈阳农业大学生物 科学 技术学院高级实验师陈贵老师鉴定为味连Coptic chinensis Franch；盐酸小檗碱对照品购自 中国 药品生物制品检定所。所用试剂均为国产分析纯。722-型光栅分光光度计（山东高密彩虹分析仪器有限公司）。 　　2 方法与结果 　　2.1 小檗碱标准曲线的制备［3］精密称取10 mg小檗碱纯品，用95 %的乙醇定容于50 ml的容量瓶中，摇匀，备用。从50 ml容量瓶中精密量取0，0.2，0.4，0.8，1.6，2.0 ml的小檗碱溶液，置于6个50 ml容量瓶中，再分别将其用95 %的乙醇定容到50 ml，振荡静置。制成一系列不同浓度梯度的溶液。用分光光度计在348 nm下测定A值,求出标准曲线为y = 0.251 3x + 0.007 6。 　　2.2 传统稀H2SO4 浸渍法提取 　　称取2.000 6 g黄连粉末倒入一个小烧杯中，按固液比1∶30的比例加入60 ml 0.2 %的H2SO4溶液，浸泡1h，过滤，得到硫酸小檗碱。用石灰乳调pH 7～8，抽滤。再用10 %的盐酸小檗碱将滤液pH调至2～3，然后加入滤液体积3 %～5 %的NaCl,静止30 min后抽滤，得到盐酸小檗碱的粗提物，在348 nm下测其A值。得盐酸小檗碱含量为101.8 mg/g。 　　2. 3 表面活性剂吐温80对黄连中小檗碱提取率的影响 　　2.3.1 吐温80用量对黄连中小檗碱提取率的影响 　　称取干燥的黄连粗粉2 g左右，置于100 ml烧杯中，按固液比（1∶30）加入60 ml的0.2 % H2SO4 ，然后加入吐温80，加入量分别为固液比2∶1，1∶1，2∶3，1∶2，按稀H2SO4粗提法测定小檗碱的含量。结果见图1，由图可知，吐温80用量为固液比1∶1时，小檗碱提取率最高。表1 正交实验因素水平（略）表2 L9（34）正交实验结果（略） 表 3 方差分析结果（略） 　　2.3.2 H2SO4浓度对小檗碱提取率的影响 　　称取干燥的黄连粗粉2 g左右，置于100 ml烧杯中，按固液比（1∶30）加60 ml H2SO4，加入3 ml吐温80，选取H2SO4的浓度分别为0.2 %,0.4 %,0.6 %，0.8 %。处理后按稀H2SO4粗提法分别测定黄连中小檗碱的含量。结果见图2，由图2可知，当H2SO4浓度为0.2%时，小檗碱提取率最高。 　　2.3.3 H2SO4 用量对黄连小檗碱提取率的影响 　　称取干燥的黄连粗粉2 g左右，置于100 ml烧杯中，按固液比（1∶25，1∶30，1∶35，1∶40）加入H2SO4，加入2 ml吐温80。处理后按稀H2SO4粗提法分别测定黄连中小檗碱的含量，结果见图3，由图3可知，H