沉降菌测试暴露时间与培养基失水率和微生物回收率的考察与研究.pdf

生物技术 医药论坛 世界 沉降菌测试暴露时间与培养 基失水率和微生物回收率的考察与研究 李天翥 齐岩 (哈尔滨珍宝制药有限公司 黑龙江哈尔滨 150060) 摘要:针对洁净区动态沉降菌监测,对上海诺狄生物科技有限公司生产的一次性90mm平皿TSA培养基,在最差温湿度条件下考察了暴露30min、 60min、90min、180min的失水率和暴露后对金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌、白色念珠菌的回收率,结果表明,在温度在30℃,湿度在40%,层流送风风速 达0.54m/s条件下,暴露180min的一次性90mm平皿TSA培养基能保证各实验菌种培养需要。 关键词:沉降菌 暴露时间 失水率 回收率 中图分类号:R91 文献标识码:A 文章编号:1674-2060(20 16)04-0243-02 《药品生产质量管理规范(2010年修订版)》附录1中对无菌药品的 上 ,尽量达到或超出标准要求上限,并在试验全程采用无线温湿度 [1] 生产的洁净环境要求和环境监测更多强调在线监测和动态监测 。 记录仪进行过程监控,确保全程能够满足挑战试验环境要求。 无菌药品生产中,尤其是无菌灌装过程,均大量使用动态沉降 1.3 培养基浇注量 菌监测无菌生产过程,在层流区域,沉降碟具操作方便、对空气环境 我公司沉降菌监测使用的为外购的一次性90mm平皿培养基, [2] 破坏较小、不会干扰气流方向、成本较低等优点,被广泛应用 。 培养基为TSA,灌注量为25ml。外购成品平皿培养基配方和灌注量 医药工业洁净室(区)沉降菌的测试方法(GB/T 16294-2010) 有规定的质量标准和专用设备浇注 ,故培养基浇注量影响不做考 [3] 中规定,动态测试时,培养皿的暴露时间为不大于4h ,《药品生产质 虑。在微生物回收率试验中,为了考察不同批次培养基的结果重现 量管理规范(2010年修订版)》中也规定动态沉降菌监测时间为4h,但 性,选择三个批号的一次性90mm平皿培养基进行试验。 [1] 单个培养皿暴露时间可以小于4h ,即考虑到培养皿随着放置时间 2 试验材料 的延长其培养基会因为失水等原因影响微生物正常生长。我公司为 确定合理的沉降菌监测时菌碟更换的时间,以及确认沉降菌暴露时 2.1 材料 间与培养基微生物回收率的关系,进行了试验。 90mm预灌装平皿(TSA培养基,上海诺狄生物科技有限公司, 批号8309141008-3、8309141014-8、8309141022-6)、风速仪、无线温 1 沉降菌暴露时间影响因素分析 湿度记录仪、万分之一电子天平、三角烧瓶、刻度吸管等。 1.1 采样区域 试验菌株 :枯草芽抱杆菌(CMCC(