MS法分析人体内25-羟基维生素D2和25-羟基维生素D3浓度的系统综述.pdf

。刚 LC-MS／MS法分析人体内25-羟基 维生素D2和25-羟基维生素D3浓度的系统综述 胡哲益 张梦琪 刘海明 桂雨舟 贾晶莹 余琛 (上海市徐汇区中心医院中心实验室 上海 200031) 摘 要 人体 系统循环中的25～羟基维生素 D，(25(OH)D，)和25一羟基维生素D (25(OH)D )浓度 反映着人体内的维生素D状态。本综述 旨在对使用LC—MS／MS法分析人体内25(OH)D浓度的方法进行全 面的综述和评价。通过搜索数据库共筛选到20篇相关文献，发现同位素内标的选择、质谱离子源、衍生化、 母离子的选择、基质效应和干扰物分离等因素会影响分析的准确度和灵敏度。为了建立一个灵敏和准确的 分析方法，需要对上述影响因素进行优化。 关键词 25一羟基维生素D， 25一羟基维生素D LC—MS／MS法 同位素内标 基质效应 中图分类号：O657；Q565 文献标识码 ：A 文章编号：1006—153a(e011)10—0477—04 1 维生素 D的生理效应及体内特点 效分离，从而获得足够的特异性。在这一方面，液相色谱 一 维生素D是一个脂溶性维生素，在维持人体内钙的 质谱联用 (LC—MS／MS)法有很大的优势。由于LC—MS／ 动态平衡方面起着非常重要的作用，能和钙一起促进儿 MS法的高选择性 、特异性和灵敏度，目前该分析技术已 童骨骼的形成和维持成人骨骼的强度。在儿童中，维生 越来越广泛地用于临床检验实验室中对 25(OH)D的分析。 素D的缺乏会导致骨骼畸形，如出现佝偻病等 ；而在成 人 中，维生素 D的缺乏会导致骨质疏松症 …。最近有研 3 LC—MS／MS法分析人体 内25(OH)D的研究现状 究证实，血清中维生素D浓度高与较低的乳腺癌 、结肠 鉴于 LC—MS／MS法在分析 25(OH)D，和25(OI~)D 时 癌和前列腺癌的发生率有显著的相关性 l2l。维生素 D缺 的独特优势，对近 10年内发表 的相关英文文献进行搜 乏也可能是一个潜在的心血管疾病危险因素 J。 索，发现采用LC—MS／MS法分析人体内25(OI4)D的研究 维生素 D主要存在两种形式 ，分别为维生素 D，和 在最近两年内有显著增长。笔者共获得 20篇相关英文文 维生素D。对绝大部分人来讲，人体在阳光照射下皮 献 [7-26] 下面就LC—MS／MS法分析人体 内25(OH)D的研 肤 中形成维生素D是维生素 D 的主要来源，而维生素 究作一全面的系统综述和评价，并对影响检测灵敏度和 D，主要存在于各种食物和植物中。这两种维生素D都 准确度的关键影响因素进行分析。 会在肝脏 中被代谢形成 25一羟基维生素 D (25(OH)D)， 3．1 针对不同人体生物样品的LC-MS／MS法分析策略 然后在肾脏中进一步被代谢形成 1，25一二羟基维生素 D 大部分研究分析的生物样 品均是人血清或血浆， (1,25(OH)，D)…。维生素 D及其代谢产物主要和血中的 但是有一项研究的分析样 品是人的唾液 ]。人唾液 中 维生素 D结合蛋白结合 ，只有0．03％的25(OH)D是以游 25(OI4)D：或25(OI-I)D 的浓度显著低于血清中的浓度 ，故 离形式存在的…。由于维生素 D和 1,25(OH)，D的半衰期 对分析 的灵敏度提 出了更高 的要求。这项研究实际上 相对较短 (2d)，故系统循环中的25(OH)D被认为是 是 目前 已经报道 的最灵敏 的分析方法，柱上绝对灵敏 反映人体内维生素 D水平的重要指标 。人血清中正常 度达到了0．7Pg。为了获得高灵敏度 ，这项研究使用了 的25(OH)D浓度约为 10～50ng／ml，而高浓度的25(OH) Cookson试剂 (4位取