基于FT-NIR的微生物快速鉴定方法.pdfVIP

第30卷，第11期 201O年l1月 Spectroscopy柚dSpectralAmlysis Nov咖ber，2010 基于FT-NIR的微生物快速鉴定方法研究 岳田利，王 军，袁亚宏，高振鹏 西北农林科技大学食品科学与工程学院，陕西杨凌712100 nearinfrared 摘要微生物细胞的傅里叶变换近红外光谱(Fouriertmmfomspectms∞py，FT-N限)反映 了细胞成分的分子振动信息，具有的高度特异性，为寻求一种基于FT-N氓的微生物快速鉴定方法提供了可 能。文章通过采集1株酵母和5株细菌标准荫株的近红外漫反射光谱，采用主成分分析法对光谱数据进行了 分析，构建了基于FT-Nm的微生物快速鉴定模跫。分析结果表明：①光谱罄别指数Dy，y2值范围为1．61士 1．05～10．97土6．65，重现性良好；②建立的基于线性判别分析模型的鉴定准确率为100％，基于人工神经网 络模型的预测结果平均相对误差为5．75％，预测准确率高。研究结果证实该方法可以实现基于Fr-N取结 合多元数学统计方法的微生物快速鉴定，并具有广阔的产业应用前景。 关键词傅里叶变换近红外光谱；微生物；快速鉴定；线性判别；人工神经网络 中图分类号：【)657．3文献标识码：A D叫：10．3964／j．issIL1000-0593(2010)11—2945．05 引 言 的微生物快速鉴定，为微生物的快速鉴定提供一种新的方 法。 常规微生物鉴定方法主要是基于微生物形态、生理生化 特性及营养特性的方法，这些方法操作复杂，费时费力。以 1材料与方法 PcR技术为基础的基因序列分析方法用于微生物的鉴定已 经得到广泛认可，但该方法操作复杂，试剂昂贵，需要专业 1．1菌种与培养基 的操作人员。这些都限制了该方法的广泛应用【1]。 微生物菌种购自中国工业微生物菌种保藏管理中心 应用分子振动光谱(红外光谱，近红外光谱，拉曼光谱) (CIlimcentero“11dustrialculture 快速鉴定微生物是近年来兴起的新型检测技术，有“分子指 称及编号如下； 纹”之称。该技术只需少量生物量的微生物便町完成分析， (1)ccJIl口，狮1)wsc￡一谪i船，CICCl027。酿酒酵母# 且光谱分析速度快，大大缩短了鉴定时间，同时用于分析的 微牛物不需要破坏细胞与添加任何化学试剂，大大提高了真 (3)B出一曲谊∞缸，CICCl0003。大肠埃希氏菌； 实性和降低了分析成本；该方法操作简单，一般技术人员便 可完成【2q]。于是红外光谱和拉曼光谱技术已经被应用于多 (5)B口f删淞sz咖i协，CIOCl0034，枯草芽孢杆菌； 种微牛物的鉴定，该方法也逐渐被接受睁引。 将阡NIR应用于微生物快速鉴定的研究还较少。Ro- 培养基：酵母浸粉4g·L～。葡萄糖2g·L～， 1 d—gu盱Saom等L协13J采用无机氧化铝膜过滤法收集菌体，采(NH4)2S0‘O．4g·L一1，MgS()4·7H20g·L一1，CaCl2· O．5 O．5 集微牛物细胞的近红外光谱。并结合多元统计分析方法。对 2H20g·L～，KH2P0‘1．2g·L_1，MnS|04·H20 细菌进行鉴定，取得r较好的效果，但氧化铝滤膜价格较 g·L～。 贵。也增加了该方法的成本。因此本研究直接采集微生物菌 1．2微生物培养及样品制备 体f燥粉末的近红外光谱，并建立基于线性判别分析(1inear微生物采用恒温摇床培养(37℃，190r·rnin-1)16h，