中药血清药理学实验方法研究概况.pdf

天 津 中 医 药 2005年2月第22卷第1期 86 ofTradjtjonalChjneseMedjcjne No，l nanjjnJoun】al Feb．2005，V01．22 中药血清药理学实验方法研究概况术 王筠，张军平 (天津中医学院，天津300193) 关键词：药理学；血清；方法学；中药 中图分类号：R331 文献标识码：A 文章编号：1672—1519(2005)0l一0086—03 中药血清药理学是指将中药或中药复方经口给动物灌 对系膜细胞胶原的合成与分泌有促进作用。张声鹏等旧认为不 服一定时间后采集动物血液、分离血清，用此含有药物成分的 同生理病理状态及不同证型对血清中含药成分都是有影响 血清进行体外实验的一种实验技术。经过十几年研究取得一 的。为了保证实验结果与在体实验的～致性，血清供体动物应 定进展，但由于处于探索阶段，其理论体系还有待完善，具体 该造模，使其处于与实验相关的病理状态。 实验操作也亟需规范，现综述如下。 2．3给药方法及采血时间 1 中药血清药理学研究背景及概念 2．3．1体外培养给药在体外培养给药之前，赵万红等f71提出， 近年来，随着细胞分子生物学的发展，许多体外实验方 应根据药效特点、药物的理化性质、实验指标等因素考虑禁食 法广泛得以建立和开展。传统的中药药理体外实验是将中药 问题。一般地，禁食时间以12一16h为宜。在实验中，含药血清 或者中药复方粗制剂直接加入离体反应体系(细胞培养、酶反 加入体外反应系统后，浓度将被稀释，从而达不到在体条件下 应)中进行的，但是由于缺乏复方体内的代谢物或机体反应物 的药物浓度，在这种情况下，如果反应系统出现阴性反应，并 等实际有效成分，机体非吸收物质的体外作用而造成假阳性； 不能排除由于药物浓度过低而出现的假阴性结果。针对这种 粗提物的理化性质(如杂质、酸碱度、pH值、鞣质)对离体反应 情况，李仪奎[8】提出两种方法：一是增大给药剂量，即给药剂 系的干扰，从而影响实验结果的正确性。 量=在体实验的给药剂量×反应体系中被稀释的倍数；二是按 有鉴于此，1984年在日本的第一届和汉医药学会上，有 新药药理研究的技术要求设计剂量给药，将含药血清制成冷 学者首次提出给药动物灌服中药粗制剂一定时间后，取其血 冻干燥粉(冻干粉)。王力倩等[9】在研究苦参、仙鹤草的抗癌作 清进行体外实验的新的药理学方法，1988年田代真一将其命 用时发现，以参考公式(给药剂量=临床常用量×动物等效面 名为“中药血清药理学”。 积系数×培养基内血清稀释度)计算给药剂量得到的含药血 2中药血清药理学研究方法存在的问题 清对肿瘤细胞体外生长有抑制作用，而比上述的参考公式计 2．1粗制剂与含药血清的差异 以往报道中有不少实验将 算的给药量小1倍的含药血清无明显作用。王宁生等【11根据 中药粗制剂直接添加到离体反应系统中的作用和含药血清 实验结果认为给药剂量以整体模型动物的有效剂量为临床成 的作用进行比较，这种比较忽略了两者发挥作用的物质基础、 人的8—18倍为宜。吴健宇等m嗵过观察采用MTT法分别检测 剂量和浓度上并非完全一致的问题。因此很难将两者进行严 含红参、黄芪血清不同添加量对胚鼠皮肤成纤维细胞增殖的 格的比较，只能说明这两者是存在差异的Ⅲ。 影响，结果发现含红参血清在与血浓度相等的条件下有明显 h)在较低 2．2对血清供体的要求不同种属的动物，其血清成分不 的抑制细胞增殖的作用，延长培养时问(孵育至48 同，汪鸿宇等日用