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从动物组织中提取线粒体的方法.pdf
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Chinese Journal of Veterinary Medicine 中国兽医杂志 2006 年 第 42 卷 第 2 期 6 1
从动物组织中提取线粒体的方法
1 ,2 2 3 3 1
臧莹安 ,丁发源 , 向瑞平 ,唐兆新 ,王小龙
( 1. 南京农业大学动物医学院 , 江苏 南京 2 10095 ;
2 . 广东省农业科学院畜牧研究所 , 广东 广州 5 10640 ;3 . 华南农业大学动物医学院 ,广东 广州 5 10642)
线粒体是细胞内重要的细胞器之一 ,其基本的功 粒子纯度为止 。
能是氧化磷酸化 ,是细胞产生 A TP 的重要场所 。线 2 提取开始前的准备 ( )
1 打开冷冻离心机 ,把转子
( )
粒体作为机体的 “动力工厂”,历来是生物学研究的 置于离心机中 ,降置低温 15 min 。 2 将聚碳酸酯离
焦点之一 。现代动物医学研究表明 ,动物机体线粒体 心管 、缓冲液 A 、B 和 C ,置于冰浴中冰冷 。
功能失调时会诱发很多疾病 ,如肉鸡腹水症和细菌内 3 心脏组织线粒体 的提取步骤 ( 1) 称取 8 . 0 ~
毒素血症等 。 8 . 5 g超低温冷冻的心肌组织 ,置于冰浴中的小烧杯
( )
近十多年来 ,随着分子生物学和生物遗传学研究 内。 2 倒入 50 ml A 液 ,用冷冻后的剪子在小烧杯
( )
技术突飞猛进的发展 ,对线粒体的研究已取得许多重 中把组织剪碎 。 3 倒掉 A 液 ,将组织移入预冷的聚
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大进展 ,其焦点已转向线粒体与细胞死亡 ,线粒体的 碳酸酯离心管中 ,换上 B 液 100 ml 。 4 在组织捣碎
( ) ( ) ( )
进化生物学 ,线粒体分子病等 。线粒体在许多生命现 机 D Y89I 型 中均质 5 次共 20 s 。 5 用提取 B
象中扮演着重要的角色 。所以,从动物组织中提取线 液稀释至 14
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