1。2基因工程的基本操作程序新.pptxVIP

1.2 基因工程的基本操作程序;;;①不能转录为信使RNA，不能 编码蛋白质。;;真核细胞的 基因结构;;;基因表达的计算;基因工程的基本操作程序;一、目的基因的获取;（一）从基因文库中获取目的基因;;基因组DNA文库;基因组文库和部分基因文库的比较;思考： 如何从基因文库中得到所需要的基因？（P9）;1.概念：PCR全称为_______________，是一项 在________复制___________的核酸合成技术。 ;过程：;;;;;;;;思考？;PCR的基本反应步骤;PCR技术扩增与DNA复制的比较;; 根据已知蛋白质的氨基酸序列，推测出相应的mRNA序列，然后按照碱基互补配对原则，推测出它的结构基因的核苷酸序列，再通过化学方法，合成目的基因。;人工合成;1.基因表达载体的目的 （1）使目的基因在受体细胞中稳定存在并可以遗传给下一代； （2）使目的基因能够表达和发挥作用。 ;2.基因表达载体的组成：;在基因表达载体构建过程中，是否只能用一种限制酶切割目的基因和载体？;启动子与起始密码子、终止子与终止密码子是一回事吗？;（1）载体与表达载体的区别：二者都有标记基因和复制原点两部分DNA片段。表达载体在载体基础上增加了目的基因、启动子、终止子三部分结构。;三、将目的基因导入受体细胞;1.将目的基因导入植物细胞;（1）农杆菌转化法;③转化过程:; 基因枪法又称微弹轰击法，是利用压缩气体产生的动力，将包裹在金属颗粒表面的表达载体DNA打入受体细胞中，使目的基因与其整合并表达的方法。;（3）花粉管通道法;2.将目的基因导入动物细胞;（2）操作程序:;常用法：Ca2+处理;受体生物;;1.检测转基因生物染色体的DNA上是否插入 了目的基因;基因探针：是一段带有检测标记，且序列已知的，与目的基因互补的核酸序列。 　;（二）鉴定（个体生物学水平）;归纳: 基因工程的基本操作程序