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第六章　微生物的生长繁殖及其控制 主讲人：刘石泉 主要内容： 三、细菌生长与分裂调节 五、微生物的高密度培养 微生物的高密度培养指在液体培养中细胞群体密度超过常规培养10倍以上时的生长状态或培养技术. 现在报道的最高记录是:E. coli W3110的174g(湿重)/L; 高密度培养常用于重组蛋白质药物的生产; 主要的优势:节约成本. 六、微生物培养法概论 实验室培养法; 生产实践中微生物培养法; 实验室培养法 生产实践中微生物培养法 最低生长温度 是指微生物能进行繁殖的最低温度界限。 最适生长温度是指某微生物群体生长繁殖速度最快的温度，代时也最短。 最高生长温度 是指微生物生长繁殖的最高温度界限。在此温度下，微生物细胞易于衰老和死亡。 致死温度 最高生长温度若进一步升高，便可杀微生物。 五类对氧关系不同的微生物在半固体琼脂柱中的生长状态模式图 半合成抗生素 半合成抗生素：对天然抗生素的结构进行改造后的抗生素 小结 1. 微生物个体生长是细胞物质按比例不可逆的增加，使细胞体积增加的生物学过程；繁殖是生长到一定阶段后，通过特定方式产生新的生命个体，使机体数量增加的生物学过程。微生物特别是细菌生长与繁殖两个过程很难绝然分开。接种时往往是接种成千上万的群体数量，因此它们的生长一般是指群体生长。群体生长是细胞数量或细胞物质量的增加。 2. 微生物生长分别可以用单细胞计数、细胞物质的重量和代谢活性等三类方法进行测量。 单细胞微生物在适宜的液体培养基中，在适宜的温度、通气等条件下培养，微生物群体生长可分为迟缓期、对数生长期、稳定生长期和衰亡期。生长的数学模型和参数对于微生物的理论研究和实际应用都越来越重要。 采用机械方法和环境条件控制可以获得同步培养，通过及时补充营养物质和及时取出培养物降低代谢产物，导致对数生长期或稳定生长期相应延长达到连续培养。 5. 每种微生物的生长都有各自的最适条件、营养物质的种类和浓度、温度、pH、氧、水活性(或渗透压)等，高于或低于最适要求都会对微生物生长产生影响。 6. 利用各种化学物质和物理因素可以对微生物生长、繁殖进行有效地控制，能够对微生物进行兴利除害方面发挥重要作用 本章思考题 试分析影响微生物生长的主要因素及它们影响微生物生长繁殖的机理。 说明测定微生物生长的意义、微生物生长测定方法的原理及比较各测定方法的优缺点。 控制微生物生长繁殖的主要方法及原理有哪些? 细菌耐药性机理是哪些?如何避免抗药性的产生? 而PABA与磺胺分子结构的相似性，可在合成四氢叶酸过程中，发生竞争性拮抗作用，合成“假”二氢叶酸，无法还原成四氢叶酸。 COO- H2N PABA H2N SOO- NH2 磺胺 人类不存在上述三种酶，不自身合成四氢叶酸（外界摄取），对磺胺不敏感，可由其抑制杀死细菌主要有： 链球菌属 [ 肺炎链球菌（S.hemolyticus）、溶血链球菌（S.pneumoniae）] 金黄色葡萄球菌（S.aureus）、痢疾志贺氏菌（S.dysenteriae）、奈瑟氏球菌属（Nersseria）、布鲁氏菌属（Brucella）。 某些生物合成或半合成的次级代谢产物或衍生物，抑 制或杀死其他微生物。 主要通过： 抑制CW合成、破坏CM、作用呼吸链、抑制Pr核酸合成。 3.抗生素（antibiotic） 青霉素与6－APA。 前者优点明显。如：抗菌活力高，毒性低，但更存在致命的缺点，易过敏，不稳定，不能口服，不耐酸，易于产生抗药菌株。 关于改进青霉素，研究其化学结构中有一高度保守的共同结构－6－氨基青霉烷酸（6－APA），虽纯6－APA抑菌效果较弱，但是半合成青霉素的母核 因此工业中取6－APA与不同化学侧链催化，以合成各种不同的半合成青霉素，如：氨苄青毒素、羧苄青毒素、羟氨苄青毒素。 细胞质膜透性改变：使抗生素不进入细胞； 药物作用靶改变： 合成了修饰抗生素的酶： 抗性菌株发生遗传变异 导致抗药性菌株的可能原因： 第一次剂量充足； 避免长时间重复使用一种抗生素； 不同抗生素混合使用； 对现有抗生素改造； 筛选更新抗生素；等 所以，抗生素使用要注意： 1.高温 高压蒸汽灭菌 煮沸消毒 间歇灭菌 干热灭菌 热敏感物质采用超高温135～150℃，2～6s，如：牛奶、液体食品等。 巴斯德消毒法：60-85℃处理15秒至30秒 二、控制微生物物理因素 十倍致死时间（decimal reduction,D）：一定温度条件微生物数量十倍减少所需要的时间。 D值大小还随微生物的种类、生长时期、检测培养基 的性质等因素有关。 多数细菌和真菌的营养细胞：在60℃左右处理5-10分钟； 酵母菌和真菌的孢子：用80℃以上温度处理； 细菌的芽孢：121℃处理15分