小儿清热利肺口服液中总绿原酸的含量测定方法研究.docVIP

　　小儿清热利肺口服液中总绿原酸的含量测定方法研究 作者：魏大华，冯敬文，王四元，龙晓英，陈金爱 【摘要】 目的 建立反相高效液相色谱法测定小儿清热利肺口服液中总绿原酸的含量。方法 采用DiamonsiLTM C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)色谱柱，乙腈体积分数0.4%H3PO4水溶液(体积比10∶90)为流动相，流速为1 mL·min-1，检测波长为327 nm,柱温为30 ℃。结果 绿原酸在质量浓度为16.28～81.4 μg范围内线性关系良好(r=0.999 6，n=5)，样品平均回收率为100.31%，RSD为1.45%。结论 本法简便、快速、准确，适用于小儿清热利肺口服液的质量控制。 【关键词】 小儿清热利肺口服液;高效液相色谱法;绿原酸;含量测定 　　Abstract:Objective To establish a RPHPLC method for the determination of total chlorogenic acids in Xiaoer Qingre LifEi ioral solution. Methods The assay ed on DiamonsiLTM C18 column obile phase of acetonirile0.4% phosphoric acid solution (10∶90) under a floL·min-1. The detection and column temperature ethod is simple,rapid,accurate and can be used for the determination of total chlorogenic acids in Xiaoer Qingre LifEI oral solution. 　　Key ination 　　小儿清热利肺口服液由银翘散和麻杏石甘汤2个古方合方化裁而成，处方由金银花、连翘、牛蒡子、麻黄、等11味中药组成[1]，主治外感风热邪在肺卫或卫气同病之风热咳嗽，用于发热、咳嗽，咯痰、流涕或鼻塞、咽痛、口渴、舌红黄等证候的小儿急性支气管炎。其中绿原酸为金银花的主要活性成分，在牛蒡子中含量亦较高。它是一种具有广泛生理和药理活性的物质，具有利胆、抗菌、降压、增加白细胞及兴奋中枢神经系统、抗肿瘤、降脂、清除自由基等多种药理作用[2]。小儿清热利肺口服液现有质量标准采用紫外分光光度法测定其盐酸麻黄碱含量，并未以绿原酸为含量测定指标。因此，本实验建立高效液相色谱法测定小儿清热利肺口服液中总绿原酸的含量，旨在为完善小儿清热利肺口服液的质量标准提供基础。 　 　1 仪器与试药 　　LC20A高效液相色谱仪(日本岛津)，SPD紫外检测器，二元高压梯度泵;BP211D 电子 分析天平(Satorius);UV2450可见紫外分光光度仪(日本岛津); HH6恒温水浴锅(宏华新佳);绿原酸对照品( 中国 药品生物制品检定所，批号：110753200413);小儿清热利肺口服液(广州潘高寿药业股份有限公司提供，批号：E06002、F03002B、F10001B、I11002B);乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。 　　广东药学院学报 第26卷 第4期 魏大华,等.小儿清热利肺口服液中总绿原酸的含量测定方法研究 2 方法与结果 　　2.1 色谱条件 　　色谱柱：DiamonsiLTM C18(250 mm×4.6 mm，5 μm)柱;流动相：乙腈体积分数0.4% H3PO4水溶液(体积比10∶90);流速：1 mL·min-1;检测波长：327 nm;柱温：30 ℃;进样量：20 μL。 　　2.2 对照品溶液的制备 　　精密称取绿原酸对照品(于室温用P2O5干燥24 h)8.14 mg，置20 mL棕色容量瓶中，加50%(体积分数)甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得对照品贮备液。精密吸取绿原酸对照品贮备液2 mL置于25 mL容量瓶中，用50%(体积分数)甲醇稀释制成每1 mL含绿原酸 0.032 6 mg的对照品溶液。 　　2.3 供试品溶液的制备 　　精密吸取小儿清热利肺口服液1 mL至分液漏斗中，用水饱和正丁醇萃取4次，每次10 mL，合并正丁醇层于70 ℃水浴蒸干，残渣用50%(体积分数)甲醇溶解，定容至50 mL容量瓶中，摇匀，用0.45 μm微孔薄膜滤过，即得。 　　2.4 阴性对照溶液的制备 　　称取处方组成中除金银花和牛蒡子外的其余药材，按照生产工艺制备阴性样品，并按“2. 3”项下方法制备，即得阴性对照溶液。 　　2.5 系统适用性试验 　　分别紧密吸取对照品、供试品、阴性对照溶液各20 μL注入液相色谱仪中，按“2.1”项下色谱