干姜超临界CO2提取物的HPLC指纹图谱研究.docVIP

　　干姜超临界CO2提取物的HPLC指纹图谱研究 作者：吴妍，冯毅凡，孟青，芮雯，李卫民 【摘要】 目的 采用高效液相色谱法建立干姜超临界CO2提取物的指纹图谱。 方法 采用C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以乙腈0.02 mol/L磷酸为流动相进行梯度洗脱，检测波长为225 nm。结果 10批干姜提取物经中药色谱指纹图谱评价软件，确定10个共有峰作为指纹特征，相似度均达到0.9以上。结论 该法建立的指纹图谱为干姜提取物的质量控制提供基础。 【关键词】 干姜；超临界CO2提取物；HPLC；指纹图谱 　　Abstract:Objective To establish HPLC fingerprints of Rhizoma zingibers extracts from supercritical carbon dioxide extraction.Methods The extracts n（4.6 mm×250 mm，5μm）using methanol0.02 mol/L phosphate acid as gradient eluents.The detection .Results Ten bathes of the extracts edicine Chromatographic Fingerprint Similarity Evaluation softilarity a zingibers extracts from supercritical carbon dioxide extraction. 　　Keya zingibers; supercritical carbon dioxide extraction; HPLC; fingerprints 　　干姜为姜科植物姜（Zingiber officinale Rosc.）的干燥根茎，用于脘腹冷痛、呕吐泄泻、肢冷脉微、痰饮喘咳等。干姜主要含姜辣素类化合物及少量的挥发油,姜辣素主要成分为6姜酚及其分解产物姜烯酚、姜酮等［1，2］。 　　2.2.2 对照品溶液的制备 　　取6姜酚对照品10 mg精密称定，甲醇超声溶解，定容至10 mL，取上述溶液1.0 mL置10 mL量瓶，以甲醇定容，得浓度为127.4 μg/mL的6姜酚对照品，用0.45 μm的微孔滤膜滤过,备用。同法制备8姜酚（82.2 μg/mL）、10姜酚（120.5 μg/mL）对照品溶液。 　　2.3 方法 学考察 　　2.3.1 精密度试验 　　取批号0612A7（云南1）的干姜提取物，按“2.2.1”项下制备样品溶液，连续进样6次，进行相似度评价，结果显示相似度均大于0.99，表明精密度良好。 　　2.3.2 稳定性考察 　　取批号0612A7（云南1）的干姜提取物溶液，按“2.2.1”项下制备样品溶液，分别在0、4、8、12、24、48 h进样，进行相似度评价，结果显示相似度均大于0.99，表明样品溶液在48h内稳定性良好。 　　2.3.3 重复性试验 　　取批号0612A7（云南1）的干姜提取物6份，按“2.2.1”项下制备各样品溶液，分别进样，进行相似度评价，结果显示相似度均大于0.99，表明重复性良好。 　　2.4 干姜提取物指纹图谱的测定 　　精密吸取对照品溶液及10批供试品溶液各10 μL，按“2.1”项下色谱条件分别进样。将10批干姜提取物的高效液相色谱数据载入相似度评价软件，经软件 分析 计算 确定了10个共有峰作为评价指标，建立了10批干姜提取物的指纹图谱（相似度评价结果见表2，图2），并生成HPLC参照指纹图（图3）。结果显示干姜提取物在225 nm下的共有峰峰面积之和占总峰面积的90％以上。本品的指纹图谱与共有模式图谱经《中药色谱指纹图谱相似度评价系统A版》比较，相似系数均不低于0.90。 　　图2 干姜提取物指纹图的相似度评价结果（略） 　　Fig.2 The similarity evaluation of fingerprint of extraction from rhizoma zingibers 　　表2 干姜提取物指纹图谱的相似度评价结果（略） 　　Tab.2 The similarity evaluation of fingerprint of extraction from rhizoma zingibers 　　图3 干姜提取物的HPLC参照指纹图谱（略） 　　Fig.3 Consult HPLC chromatogram of extraction from rhizoma zingibers 　　2.5 干姜提取物指纹图共有峰的确认 　　本品的指纹图谱与共