细胞生物学重点剖析.docxVIP

细胞生物学（注：标注★的为答疑ppt最后一页的题，据说很可能出大题）绪论细胞生物学：研究细胞基本生命活动规律的科学，其在不同层次（显微、超微和分子水平）上以研究细胞结构、功能和生活史为主要内容，核心问题是将遗传与发育在细胞水平上结合起来细胞：是由膜包围着含有细胞核（或拟核）的原生质所组成，是生物体的结构、功能和生命活动的基本单位，是生物体个体发育和系统发育的基础。细胞学说：Schwann提出，有机体由细胞构成；细胞是构成有机体的基本单位。基本内容：细胞是有机体，一切动植物都由细胞发育而来，并由细胞及其产物构成。每个细胞作为一个相对独立的单位，既有它自己的生命，又对与其他细胞共同构成的整体的生命有所助益。新的细胞可由老的细胞繁殖产生。人类基因组计划：由美国科学家于1985年率先提出，于1990年正式启动的。按照这个计划设想，要把人体内约10万个基因的密码全部解开，同时绘制出人类基因的谱图。简述细胞生物学发展史上的主要事件。细胞生物学的历史大致可以划分为四个主要的阶段：? 第一阶段：细胞的发现，16世纪末-19世纪30年代。? 第二阶段：细胞学说提出，19世纪30年代-20世纪中期。? 第三阶段：超微结构研究，20世纪30年代-70年代。? 第四阶段：分子细胞生物学，20世纪70年代分子克隆技术出现以来其中1665 Hooke 命名细胞1838 Schwann 细胞学说1866 mendel 遗传分离定律和自由组合定律1953 Watson Crick DNA双螺旋模型1975 Milstein Kohler 单克隆抗体1983 Mullis PCR仪器详见课本P1-P5的表格，诸位看官自己看吧（太多了……）细胞生物学研究方法分辨力：又称分辨本领，指将临近两点清晰区分辨认的能力，即分辨物体最小间隔的能力。原代培养：即培养直接来自动物机体的细胞群。细胞株：从原代培养细胞群中筛选出具有特定性质或标志的细胞群细胞系：从肿瘤组织培养建立的细胞群或培养过程中发生突变或转化的细胞，可无限繁殖。克隆：亦称无性系。由同一个祖先细胞通过有丝分裂产生的遗传性状一致的细胞群。简述光学显微镜（正置、倒置、荧光）、电子显微镜（扫描、透射）的成像原理。正置光学显微镜：来自光源的光线经物镜汇聚第一次成像，这个物像又会通过目镜进一步放大，最终在我们眼睛的视网膜上形成实像。倒置显微镜：物镜与照明系统颠倒，前者在载物台之下，后者在载物台之上，用于观察培养的活细胞，通常具有相差物镜，有的还具有荧光装置。荧光显微镜：光源为紫外线，波长较短，分辨力高于普通显微镜；有两个特殊的滤光片；照明方式通常为落射式。电镜：在一个高真空的系统中，由电子枪发射电子束，照射观察的样品产生效应信号，经电子透镜聚焦放大，最后在荧光屏上显示出放大的图像的显微镜。透射电镜：主要用于观察细胞内部的细微结构，分辨力0.2nm，放大倍数可达百万倍，可对细胞内所包含的病毒，甚至蛋白质、核酸等大分子结构进行研究扫描电镜：扫描电镜的分辨率较透射电镜低，一般在6~10nm，但其形成的图像具有立体感，可从不同的角度观察样品（由于样品可以在样品室内水平移动和转动），另外还具有样本制备比较简便、周期短的特点。简述电镜标本的制备方法。在透射电镜的样品制备方法中，超薄切片技术是最基本、最常用的制备技术。超薄切片的制作过程基本上和石蜡切片相似，需要经过取材、固定、脱水、浸透、包埋聚合、切片及染色等步骤。取材：尽可能保持生活状态，避免损伤。固定：戊二醛和四氧化饿。脱水：电镜不能观察含水的标本。包埋：环氧树脂切片：超薄，50-100nm染色：醋酸铀，枸橼酸铅。激光共聚焦显微镜的原理是什么？LSCM的基本原理就是共聚焦成像，所谓共聚焦是指物镜和聚光镜相互共焦点，即两者同时聚焦到一个点，保证了只有从标本焦平面发出的光线聚焦成像，焦平面以外的漫射光不参加成像，这样大大提高了分辨率，使图像异常清晰。流式细胞仪工作原理是什么？包在鞘液中的细胞通过高频振荡控制的喷嘴，形成包含单个细胞的液滴，在激光束的照射下，这些细胞发出散射光和荧光，经探测器检测，转换为电信号，送入计算机处理，输出统计结果，并可根据这些性质分选出高纯度的细胞亚群，分离纯度可达99%。包被细胞的液流称为鞘液，所用仪器称为流式细胞计免疫组化的原理是什么？把组织中的特异分子作为抗原，用各种在显微镜下可见的标记物标记特异抗体或标记抗原抗体复合物，使特异的免疫化学反应具有可见性，从而间接地显示抗原，达到在细胞或细胞器水平定位特异分子的目的。细胞膜与细胞外被细胞质膜：是指包围在细胞表面的一层极薄的膜，主要由膜脂和膜蛋白所组成。质膜的基本作用是维护细胞内微环境的相对稳定,并参与同外界环境不断进行物质交换、能量和信息传递。另外,在细胞的生存、生长、分裂、分化中起重要作用。