荧光原位杂交技术操作的常见问题分析.pdfVIP

. 1426. 临床与实验病理学杂志 J Clin Exp Pathol 2015 Dec ;31 ( 12) 网络出版时间 :2015 -12 -17 17 :05 网络出版地址:/kcms/detaiV34.1073.R1705.028.html 荧光原位杂交技术操作的常见问题分析 ⑤运t 技术交流 江冬瑞，王弦，吴强 关键词:荧光原位杂交;免疫组织化学;临床病理:诊断 1 开展 FISH 所需要的实验条件和人员培训 中固分类号:R446 文献标志码:B 文章编号:1001 -7399(2015)12 -1426 -02 建立 FISH 技术平台，除需要一间可以进行荧光实验操 doi: 10. 13315/j. cnki. 叮cep.2015.12.028 作和显微观察暗室外，还需要原位杂交仪、荧光显微镜、显微 镜滤光片、水浴箱、游涡I昆合器、普通离心机、移液器、FISH 目前，荧光原位杂交技术(fluorescence in situ hybridiza- 探针试剂盒、无水乙醇、二甲苯、去离子水、橡胶水泥、透明指 tion , FISH) 因具有灵敏度高、特异性强、定位明确及结果客 甲油等设备和试剂。 观等优点[1] ，在临床上己应用于产前染色体数目检测、肿瘤 由于 FISH 检测具有敏感性和客观性，任何一个步骤的 基因检测，如多发性骨髓瘤检测和慢性淋巴细胞性白血病等 微小失误均有可能对结果的判读产生偏差，进而对临床的合 的检测，担负着辅助病理诊断和指导临床用药的重任。日常 理用药产生影响，因此就对操作的技术人员在熟练和规范程 病理诊断中，应用 FISH 技术检测乳腺癌HER-2 和TOP2A 基 度做出更高的要求。作者建议每一个开展分子病理检测的 因扩增，可以判断预后，指导靶向治疗和辅助化疗;在非小细 病理科设置专门的分子病理室并由专人操作，并且要求专门 胞肺癌中检测 EGFR 基因突变，可以筛选靶向治疗的适用人 的技术人员有相关的分子生物学理论知识，并经过专门培 群;检测 TERC 基因用来进行子宫颈病变临床分级和预测子 训11 ，有一定的实验室工作经验。 宫颈癌的进展[2]; 另外在淋巴瘤和前列腺癌等方面，还有一 些探针可以用于辅助诊断。 2 固定班的选择及固定时间 虽然 FISH 检测技术具有安全、试验周期短、探针能长期 石蜡组织建议用 109毛中性缓冲福尔马林固定6 -48 h , 保存、能同时显示多