松茸多糖两种测定方法的比较研究.docVIP

　　松茸多糖两种测定方法的比较研究 作者：刘倩，何法林，江春花，白淑芬，王慧芳，喇万英 【摘要】 　　目的选择一种准确、稳定、简便的松茸多糖含量测定的方法。方法对硫酸-蒽酮法和苯酚-硫酸法测定松茸子实体多糖的含量进行比较。结果硫酸-蒽酮法和苯酚-硫酸法分别在1.2～12 mg·L-1(r=0.999 3)和1.5～15 mg·L-1(r=0.999 1)范围内呈线性关系；精密度实验RSD分别为0.13%和0.31%；硫酸-蒽酮法在3h内稳定，苯酚-硫酸法在6h内稳定；含量测定结果分别为4.28%和4.95%。结论苯酚-硫酸法测定松茸多糖含量显色灵敏，颜色稳定，操作简便，可作为测定松茸多糖含量测定的方法。 【关键词】 松茸； 多糖含量； 蒽酮-硫酸法； 苯酚-硫酸法 　　Abstract：ObjectiveTo select a more accurate, stable and convenient method for detemination of Polysaccharide content in Tricholoma matsutake Sing. MethodsPolysaccharide content in Tricholoma matsutake Sing ined by tethods: athranone-sulfuric acid method and phenol-suifuric acid method. ResultsThe standard curve of athranone-sulfuric acid method and phenol-suifuric acid method g·L-1(r=0.999 3) and 1.5～15mg·L-1(r=0.999 1) , athranone-sulfuric acid method ethod. ethod is sensitive，stable and convenient and can be used for determination of polysaccharide content in Tricholoma matsutake Sing. 　　Key a matsutake Sing； Polysaccharide content; Anthranone-sulfuric acid method; Phenol-suifuric acid method 松茸Tricholoma matsutake Sing.是赤松、 台湾 松等树木的活体共生菌，又称松茸、松蕈、松蘑、鸡丝菌,属担子菌亚门、层菌纲、伞菌目、口蘑科、口蘑属［1］。子实体味道鲜美，有很高的营养价值和特殊的药用效果，被誉为“蘑菇之王”［2］。 现代 研究表明，松茸有 治疗 糖尿病、抗癌、镇咳、祛痰、平喘等作用［3］。松茸多糖含量的测定，有采用苯酚-硫酸法［4］，有采用硫酸-蒽酮法［5］。本文对松茸多糖的两种测定方法进行了比较研究，以选定一种方便快捷的适合松茸多糖含量测定的方法。 　　 1 仪器 　　1.1 仪器722分光光度计；水浴锅， 电子 天平，干燥箱、循环水真空泵。 　　1.2 试药葡萄糖（ 中国 药品生物制品检定所）;95%乙醇、浓硫酸、蒽酮、苯酚均为分析纯，水为双蒸水。松茸购自吉林省博苑长白山特产科技有限公司。 　　 2 方法与结果 　　2.1 对照品溶液的配制精密称取经105℃干燥至恒重的无水葡萄糖对照品10 mg，置100 ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，配制成每毫升中含无水葡萄糖0.1 mg的对照品溶液。 　　2.2 样品溶液的制备精密称取60℃干燥至恒重的松茸细粉0.5g，置圆底烧瓶中，加80%乙醇150 ml，加热回流1 h，趁热滤过，残渣用80%乙醇洗涤3次，将残渣及滤纸置烧瓶中，加水150 ml，加热回流1 h，趁热滤过，烧瓶及残渣用热水洗涤3次，合并滤液与洗液，转移至250 ml量瓶中，加水至刻度，摇匀。 　　2.3 硫酸-蒽酮法测定松茸多糖的含量 　　2.3.1 标准曲线的制备精密量取对照品溶液0.1，0.2，0.4，0.6，0.8，1 ml，分别置10 ml具塞刻度试管中，各加水至2.0 ml，摇匀，在冰水浴中缓慢滴加0.2%蒽酮-硫酸溶液至刻度，摇匀，冷却后置沸水浴中保温10 min，取出，立即置冰水浴中冷却10 min，取出，以相应试剂为空白。照紫外-可见分光光度法，在620 nm波长处测定吸光度。以吸光度(Y)为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线［6］，建立回归方程：Y=0.035 7 X+0.022 2(r=0.999 3)。结果表明：浓度在1.2～12 mg·L-1范围内线性关系良好。 　　2.3.2 空