安春菊-中国农业大学植物保护学院.doc

中国农业大学 本科生“URP”立项申请书 项目名称 亚洲玉米螟C型凝集素CTL13功能的初步研究 申 请 人 安春菊 工作单位 植物保护学院 联系电话 010 电子信箱 anchunju@cau.edu.cn 填表日期 2016年3月22日 中国农业大学教务处制 项目名称 亚洲玉米螟CTL13功能的初步究 项目起止时间 2016年5月至3月 项目申请人情况 姓名 安春菊 性别 女 出生日期 1977.3 最后学历与学位 博士/博士 专业技术职务 副教授 从事专业 昆虫学 项目概况 本项目主要对亚洲CTL13性质和功能研究，通系统获得重组蛋白Ni-NTA亲和层析系统离子交换系统蛋白亚洲玉米螟的和功能。 二、实施计划及方案(明确各个环节对培养学生创新能力的具体思路及考核办法) 实施计划： -2016年8月：115重组酵母细胞，并纯化CTL13重组蛋白 2016年9月-2016年12月：利用获得的重组蛋白，体内和体外结合试验，研究体液免疫和细胞免疫中的作用；2017年1月-2017年3月：试验总结方案：1、CTL13重组蛋白的表达及纯化 对实验室已经得到的酵母阳性菌株进行诱导培养，Mut+或Muts 类型，按照预实验条件进行诱导表达，通过优化重组酵母表达目的蛋白的条件，获得CTL13重组蛋白-琼脂糖凝胶(Ni-NTA)亲和层析及离子交换层析等方法获得高纯度的目的蛋白。 2、CTL13在亚洲玉米螟细胞免疫和体液免疫中的功能 （1）通过体外凝集试验，将CTL13重组蛋白与细菌或 （2）CTL13对细菌或真菌的凝集作用是否是Ca2+依赖性的； （3）通过体外结合试验，将CTL13重组蛋白与某些微生物细胞壁组分共同温育，检测CTL13能否特异性地识别并结合某些微生物细胞壁组分，如脂多糖、脂磷壁酸 （4）将琼脂糖微球珠用重组蛋白包被，然后与含有淋巴细胞的淋巴液共同培养，观察CTL13能否增强黑化作用和淋巴细胞的包囊作用； （5）通过淋巴细胞体内吞噬试验，分析CTL13能否促进淋巴细胞对球孢白僵菌的体内吞噬作用 三、项目实施的基础和条件 本实验室一直致力于对亚洲玉米螟天然免疫研究，并仪13的酵母表达载体，并转入相应的酵母表达细胞 四、学生提交的成果 预期成： 选择成功CTL13重组蛋白 2、利用亲和层析及离子交换系统CTL13重组蛋白； 3反应中的 4、撰写试验报告，争取发表相关论文一篇 五、经费预算 实验材料费：1000元 主要包括生试剂分子生物学试剂辅助材料等。设备费1000元 主要用于小型仪器设备移液器胶槽、层析的。 六、学院URP领导小组意见 签字 （盖章） 月 日 1