5.消毒灭菌试验.pptVIP

* * 第四次实验报告问题： 1. 金葡萄菌×，金葡菌√ 2. 结果：观察到两种菌落：一种？？，另一种？？ 结论： 3.结果：大肠杆菌沿穿刺线向周围扩散生长 痢疾杆菌：？？？ 结论：大肠杆菌 动力+ 痢疾杆菌 动力- 4.结果：观察到针尖样草绿色溶血环菌落 结论：？？？ 原因：大肠杆菌抑制金葡菌 实验五 细菌的分布检查、消毒灭菌试验 一、细菌的分布检查 1. 空气中细菌的检查（操作） p-55 2. 皮肤、日常物品细菌的检查（操作） p-56 二、消毒灭菌试验 1. 紫外线灭菌试验（操作） p-61 2. 化学消毒剂的消毒灭菌试验（操作） p-61 3. 煮沸与高压灭菌试验（操作） p-60 1. 空气中细菌的检查(操作,3块/班,小平板) p55 材料： 普通琼脂平板 方法： 结果： 计数菌落数，观察菌落数的差异。 对照 37℃×18~24h 室外20min 教室20min 结论： ？？？ 菌落计数方法 2. 皮肤、日常物品细菌的检查(操作,1块/4人,大平板) p56 材料： 方法： 结果： 普通琼脂平板 皮肤、头发、衣服、钞票 皮肤 头发 衣服 钞票 计数菌落数 37℃×18~24h 结论： ？？？ 3. 紫外线灭菌试验(操作,1块/4人,小平板,大肠杆菌) p61 材料： 方法： 结果： 普通琼脂平板 大肠杆菌、紫外线 紫外线×30分钟 37℃×18~24h 原理： 结论： ？？？ ?：260~266nm（最佳杀菌波长） 杀菌原理：使DNA上相邻的T碱基通过共价键结合成 二聚体，干扰DNA复制与转录，导致细菌死亡。 特点：穿透力弱，对皮肤、眼有损伤。 适用范围：适用于空气和物体表面消毒。 紫外线（ ultraviolet ray，UV） 4. 化学消毒剂的消毒灭菌试验和药敏试验 (操作,2块/4人,大平板,大肠杆菌,金葡菌) p61 材料： 方法： 普通琼脂平板 大肠杆菌、金葡菌 氯霉素、青霉素、碘酒、结晶紫 大肠杆菌 金葡菌 碘 紫 氯 青 碘 紫 37℃×18~24h 药敏试验 --纸片法 氯 青 碘 紫 结果： 抑菌圈 大肠杆菌 金葡菌 氯霉素 青霉素 碘酒 结晶紫 （直径mm） 特别观察： 青霉素对两种细菌的杀菌结果，为什么？ 结论： ？？？ 结果判断 抑菌圈直径≥15mm：高度敏感 抑菌圈直径10~15mm：中度敏感 抑菌圈直径≤10mm：低度敏感 无抑菌圈：不敏感或耐药 注意： 无菌操作 5. 煮沸与高压灭菌试验(操作,2块/4人,小平板, 大肠杆菌,枯草芽胞杆菌) p60 材料： 方法： 普通琼脂平板 大肠杆菌，枯草芽胞杆菌 大肠杆菌 100 ℃ 10′ 121 ℃ 20′ 对照 100 ℃ 10′ 121 ℃ 20′ 对照 枯草芽胞杆菌 37℃×18~24h 原理： 种类 方法 效果 用途 干 热 焚烧 用焚烧炉燃烧 灭菌 废弃污物、尸体 烧灼 火焰烧灼 灭菌 接种环，试管口 干烤 干烤箱，热空气 160~170oC×2h 电磁波热效应 灭菌 灭菌 玻璃器皿等耐高温的物品 医疗器械 湿 热 煮沸法 100oC×5~10分钟，沸水 消毒(芽胞杀不死） 饮水和食具 高压蒸气灭菌法 高压蒸气灭菌器 103.4Kpa(15磅/吋2/1.05Kg/cm2) 121.3oC×15~20分钟 灭菌（芽胞杀死） 耐高温、耐湿物品 （基础培养基、生理盐 水、手术辅料等） 红外线 结果： 菌名 对照 煮沸 高压 大肠杆菌 枯草杆菌 注：+有细菌生长 -无细菌生长 结论： ？？？ 高压蒸汽灭菌法的使用：p58 加水→装锅→加盖→排气→灭菌→起锅 * *