LC-5500 高效液相色谱仪测定水产品中孔雀石绿.pdfVIP

北京东西分析仪器有限公司 LC-5500 高效液相色谱仪测定水产品中孔雀石绿 前言 孔雀石绿（ MG ）为三苯甲烷类工业染料 , 在水产养殖上可以有效的预防与治疗各类 水产动物的水霉病、鳃霉病和小虫病。并常用于鱼苗的消毒。但一些水产品贩运商为保持水 产品新鲜度普遍用 MG 消毒车厢和活鱼池； 酒店为了延长鱼的存活时间也在鱼池中投放 MG 进行消毒。使用 MG 消毒后的鱼即使死亡后颜色也较为鲜亮，消费者很难从外表进行 辨认。 MG 在水生生物体中的主要代谢产物为无色孔雀石绿（ LMG ）。 MG 具有毒性 强、高残留和致畸、致癌、致突变等副作用。 LMG 由于不溶于水，其残留毒性比 MG 更 强 。 所以，目前世界上诸如美国、日本、加拿大和欧盟等许多国家已将 MG 列为水产养 殖禁用药物，我国也于 2002 年 5 月将其列入 “ 食品动物禁用的兽药及其化合物清单 ” （1 ） 。虽然 MG 已被列为水产养殖禁用药物，但因为其价格低廉，同时目前在水霉病 防治上尚无其它有效药品，因此仍有一些水产养殖户在普遍使用。 各类水产品中 MG 和 LMG 的检测是我国食品卫生学面临的新课题。为此，我国农业 部2004 年颁布了水产品中 MG 残留量测定的行业标准检验法 - 液相色谱法 （SC/T3021-2004 ）（2 ）；国家质量监督检疫总局和国家标准化管理委员会于 2005 年 亦发布了“液相色谱 - 串联质谱法”和“高效液相色谱法” （（GB/T19857-2005 ） （3 ） 的标准检验法。 Chang-Jun Cha 等报道了（ 2001 ）采用氰基柱的反相高效液相色谱法和 液质联机检测 MG （4 ） 。 在上述分析方法中， SC/T3021-2004 采用 C 18 柱，等梯度洗脱方式，但需要较大流 速（ 2ml/min ）；而 GB/T19857-2005 法采用 C 18 柱，梯度洗脱方式。文献（ 4 ）采用 氰基柱分离的梯度洗脱方式。我们在研究这些分析方法的基础上，采用氰基柱分离、流速为 1.0mL/min 的等梯度洗脱方式，具有保留时间短、分离效果好、分析速度快、节省试剂；最 低检测浓度无 LMG 为 0.02 μ g/mL ， MG 为 0.05 μ g/mL 。精密度高；特别是线性范围 达 0.1 μ g/mL ～ 160.0 μ g/mL ，远远大于 SC/T3021-2004 线性范围（ MG 0.01 μ g/m L ～ 0.4 μ g/mL ； LMG0.02 μ g/mL ～ 0.40 μ g/mL ）。而且，等梯度洗脱方式又扩大了液相 色谱的应用范围。现将结果报告如下： 1 材料与方法 1.1 材料 1.1.1 试剂 乙睛 色谱纯， fishte ； 乙酸铵 ， hplc 纯 ， DIKMA ； 孔雀石绿（ MG ） sigma 试剂； 无色孔雀石绿（ LMG ） sigma 试剂。 1 北京东西分析仪器有限公司 0.125mol/L 乙酸铵溶液 称取乙酸铵 9.64 g ，用纯水溶解并定容至 1000mL 。用 0.45 μ m 滤膜过滤。 MG 标准储备液 准确称取孔雀石绿 0.100 0g ，用乙睛溶解并定容至 100 mL 。该标 准溶液浓度为 1mg/mL 。避光、冰箱冷冻层保存。 MG 标准应用液 吸取 1mg/mL 孔雀石绿