海南胆木药材指纹图谱研究.docVIP

　　海南胆木药材指纹图谱研究 作者：李海龙，谭银丰，赖伟永，刘明生，符乃光，张俊清 【摘要】 目的采用高效液相色谱法建立海南胆木药材的指纹图谱,为海南胆木药材的生产提供质量控制方法。方法采用高效液相色谱法, 色谱柱为Diamonsil TM C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；检测波长为227 nm；流动相为甲醇-0.10%磷酸水溶液，二元梯度洗脱。结果海南胆木药材指纹图谱中，共有峰相对保留时间与相对峰面积的精密度、重复性和稳定性的RSD均小于3%，符合有关规定。结论所建立指纹图谱可用于海南胆木药材的质量控制。 【关键词】 海南胆木； 高效液相色谱法； 指纹图谱； 质量控制 　　Abstract：ObjectiveTo establish the Fingerprint Chromatography of Hainan Nauclea officinalis by HPLC and provide the method for quality control of Hainan Nauclea officinalis.MethodsAn HPLC method onsil TMC18 column(250 mm×4.6 mm，5μm) and a mixture of methanol-0.10% phosphoric acid solution(dual gradient elution) as the mobile phase . ResultsHPLC fingerprint chromatography of 10 batches of samples ethod had a good repeatability and the 8 mon peaks had an exclusive properties. ConclusionThe fingerprint established can be used for quality control of Hainan Naucleae officinalis. 　　Key onsil TM C18（250 mm×4.6 mm，5 μm）；检测波长为227 nm；柱温为30℃；流动相为甲醇-0.10%磷酸水溶液，二元梯度洗脱，洗脱时间为70 min， 流速为1.0 ml/min；进样量为20 μl，所有组分在70 min内出峰完毕。梯度洗脱条件见表1。 　　2.2 溶液制备 　　2.2.1 对照品溶液制备精密称取异长春花苷内酰胺对照品适量，置于10 ml容量瓶中，加甲醇溶液适量溶解，并定容至刻度，配制成质量浓度大约为160 μg/ml的对照品溶液。表1 梯度洗脱条件（略） 　　2.2.2 供试品溶液制备取胆木药材0.5 g，精密称定，置100 ml具塞锥形瓶中，加入70%乙醇50 ml，称重，于沸水浴中加热回流40 min，放冷，称重，用70%乙醇补足减失的质量，滤过，取续滤液适量，以0.45 μm 微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。 　　2.3 方法学考察 　　2.3.1 精密度实验取同一份供试品溶液，连续进样6次，记录其图谱。 计算 各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积比值的RSD。 结果表明，RSD分别为0.09% ～0.21%和0.19%～2.55%,均小于3.0%，符合指纹图谱的要求。 　　2.3.2 稳定性实验取同一份供试品溶液，分别于制备后0, 2, 4, 8, 16, 24 h进样，记录其图谱。计算各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积比值的RSD。 结果表明，RSD分别为0.06%～0.23%和0.21～2.68%，均小于3.0%,符合指纹图谱的要求。 　　2.3.3 重复性实验取同一批次的胆木6份,按供试品溶液制备方法制备供试品溶液,分别进样,记录其图谱。计算各色谱峰的相对保留时间和相对峰面积比值的RSD。 结果表明,RSD分别为0.08%～0.22%和0.21%～2.94% ,均小于3.0% ,符合指纹图谱的要求。 　　2.4 指纹图谱的建立、分析与评价 　　2.4.1 指纹图谱的建立 　　按照供试品溶液制备方法将10批药材制备成供试品溶液，分别进样检测，测定所有供试品溶液的HPLC色谱图。根据10批次供试品测定结果所给出的峰数、峰值(积分值)和相对保留时间等相关参数,进行分析、比较，制定优化的指纹图谱。见图1。 　　2.4.2 共有峰确定 　　根据10批胆木供试品的检测结果，比较色谱图。选择胆木供试液图谱中峰面积较大、峰形较好的色谱峰作为共有峰，共8个(见图2)，其中7号峰为异长春花苷内酰胺（为胆木药材主要成分），其峰面积约占总峰面积70%，峰形稳定，可将该峰作为参照峰。 　　2.4.3 共有峰相关信息 　　根据10批胆