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引物浓度与退火温度不当导致巢式PCR非特异性扩增2008
成都医学院学报2008
’J、‘，，3(2)
d Medical
Claengdu College
·论 著·
引物浓度与退火温度不当导致巢式PCR非特异性扩增
刘 阳1，杨淑霞1，李敏惠1，李丽梅1，胡松1，刘 进2，邹 强1+
(成都医学院1．科研实验中心，2．药学系20(16级药物制剂本科班，成都610083)
【摘要】 目的探索巢式PCR非特异性扩增的产生原因及消除方法。方法以巢式PCR扩增乙型肝炎病毒
(HBV)S
gene为模型，分别使用小同退火温度组合与不¨引物浓度组合进行巢式PCR扩增，观察并分析实验结
果。结果降低引物浓度或提高退火温度均可?肖除巢式PCR的非特异性扩增，但提高退火温度有可能影响反应的
扩增效率，导致产物链下降甚至得不到产物。结论巢式PCR发牛非特异性扩增时，叮以提高退火温度或降低引
物浓度对反应体系进行优化。
S
【关键词】 巢式PCR；HBV
gene；非特异性扩增
33
【中图分类号】R 【文献标识码】A 【文章编号】1674—2257(2008)02—0111—04
PrimerConcentrationand Cause Am-
Improper AnnealingTemperatureNonspecific
May
inNestedPCR
plicafion
LIU Shu—xial，LIMin—huil，LILi—meil，HU Jin2，ZOU
Yan91，YANG Son91，LIU Qian91
Researchand Medical
(1．Center
of Experimentation，2．2006s，‰州，schoolofpharmacology，ChengduCollege，Cheng,iu
610083，China)
Tofindthereasonof innestedPCRandabateit．MethodsTo HBV
AhsWact：Objective nompecific
causing amplication amplify
S NestedPCRindifferentconcentrationand andolJsenrether℃sult．ResultsBoth
gene elevating
by primer annexingtemperature
and concentrationcanabate innestedPCR．But anneal—
annealingtemperaturedecreasingprimer nonspecificamplication elevating
affectthe thatT_esmttodecre㈣oreliminatethePCR When
ingtemperaturemay anlphfyingeffciency products．Conclusionnonspe-
cific innested and
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