甘草与附子配伍对甘草黄酮溶出影响的实验研究.docVIP

　　甘草与附子配伍对甘草黄酮溶出影响的实验研究 作者：沈少华 张宇燕 杨洁红 孙国金 【摘要】 目的探讨甘草与附子配伍后甘草黄酮含量的变化。 方法以甘草苷为对照品，用高效液相色谱法测定甘草及其甘草与附子配伍前后煎煮液中甘草苷的含量。结果甘草苷在4.4～44 μg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.999 8)；甘草与附子配伍后合煎比甘草单煎液甘草苷的含量降低。 结论甘草与附子配伍，使甘草苷等黄酮类成分的含量降低，为中医配伍提供了物质基础上的依据。 【关键词】 甘草苷 含量测定 附子 配伍 Abstract：ObjectiveTo observe the changes of liquirtin content before and after patibility of Licorice Licorice admixture of Licorice ance liquid chromatography（HPLC).ResultsThe linear range l（r=0.999 8）.The content of Liquirtin decocted from admixture of Licorice Licorice individually.ConclusionThe patibility of Licorice ony，and the changes of flavonoid content such as Liquirtin is one of material bases. Key ination； Aconite； patibility 甘草是豆科植物甘草Glycyrrhiza uralensis Fisch.胀果甘草Glycyrrhiza inflata Bat.或光果甘草Glycyrrhiza glabra L.的干燥根及根茎［1］。具有补脾益气、清热解毒、 祛痰止咳、缓急止痛、调和诸药的功效。其主要化学成分有三萜类、黄酮类（甘草黄酮、异甘草黄酮、甘草素、异甘草素等）、生物碱类及多糖类。 现代 研究表明，甘草黄酮具有明显的抗肿瘤［2］、抗氧化作用，对溃疡［3］、肝损害、病原微生物、酶及抗炎和抗变态反应作用等方面都有明显的药理作用。　 临床附子常与甘草配伍，甘草能降低附子毒性，还可以促进附子的强心作用，其中甘草酸、甘草黄酮与附子生物碱之间起着十分关键的作用，以往侧重于研究甘草酸和附子生物碱的变化，而甘草黄酮能拮抗乌头碱引发的心律失常，也为降毒的主要有效成分，可能在甘草与附子配伍过程发挥作用，为附子与甘草配伍能减毒增效的重要物质基础。本实验针对甘草黄酮在配伍中关键作用，以甘草苷为代表从药物分析学角度进行配伍研究，用高效液相色谱法测定甘草中甘草苷的含量，比较甘草单煎、甘草与附子配伍合煎对甘草黄酮（甘草苷）溶出的影响，研究附子与甘草配伍减毒增效的物质基础，以期为中医配伍理论提供可靠的实验依据。 1 仪器与材料 1.1 仪器 日本岛津高效液相色谱仪：LC-10ADVP系列，VP-ODS C18柱（150 mm×4.6 mm，5 μm），LC-10ADVP高压泵，CTO-10AVP柱温箱,SPD-10AVP紫外检测器；TU-1900双光束紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；AG135 电子 天平（瑞士，梅特勒-托利多仪器有限公司）；Simplicity超纯水仪（美国Millipore corporation）；USC-202超声波清洗器（上海波龙电子设备有限公司）；DGG-9140A型电热恒温鼓风干燥箱（上海森信实验仪器有限公司）。 1.2 药品与试剂 甘草苷标准品（111610-200604， 中国 药品生物制品检定所，购自浙江省药品检验所）；甘草、附子（购自浙江省临安市医药药材有限公司）；乙腈（色谱纯,韩国Korea,SK chemicals）；无水乙醇、醋酸等均为分析纯；水为超纯水。 2 方法与结果 2.1 色谱分析条件［1］流动相为乙腈-0.5%醋酸(15∶85)，流速为1.0 ml/min，紫外检测波长276 nm，柱温30℃，进样体积为20 μl，理论塔板数按甘草苷计不低于3 000。在该色谱条件下,对照品及样品的色谱图见图1～3。 2.2 对照品溶液的制备 取甘草苷标准品2.2 mg，加甲醇溶解,并用甲醇定容至50 ml，作为浓度44 μg/ml的对照品溶液。 2.3 供试品溶液的制备 取甘草5 g，甘草5 g和附子5 g，加水100 ml，浸渍30 min，煎煮1 h，过滤，药渣加水50 ml，过滤，合并滤液，低温浓缩定容至100 ml。取定容液10 ml，加无水乙醇至25 ml，冷藏24 h，过滤，滤液浓缩定容至25 ml，定容液过