Amide80系列色谱柱分离糖类中文1.pdf

分离报告No.55 使用TSKgel Amide-80 高效正相分配色谱填料 分离糖类1 目录 1. 简介 1 2. 糖类的洗脱行为 1 3. 方法开发 4 4. 应用 5 5. 操作条件注意事项 6 6. 结论 8 SR055 1001 1. 简介 2. 糖类的洗脱行为 糖类是一类基本物质，可表达各种生物活性，并可能独立 2-1 分离机制和温度的影响 存在或者与蛋白质或脂质形成复合物。对复合碳水化合物 中的糖类和糖链进行分析可以为医疗、科研、食品等行业 TSKgel Amide-80 可在有机/水溶剂系统 （例如乙腈/水）中 提供有价值的信息。在过去，糖类分析使用了各种方法， 保留极性化合物 （例如糖和多元醇）。为了说明这一点，图 包括不同的高效液相色谱(HPLC) 模式。 1 中的色谱图显示了各种糖醇的分离。基本上，化合物的 羟基越多，其极性就越大，在TSKgel Amide-80 柱上保留 根据聚合和缩合程度，糖类可分为单糖、双糖、寡糖和多 的时间就越长。此外，对甘露醇和肌醇（各有6 个羟基） 糖。单糖和双糖的分离方法包括阴离子交换色谱法 （在存 的保留情况的比较表明，由于肌醇为环状结构并且在流动 1 相（乙腈/水系统）的溶解度较低，其保留时间更长。通 在硼酸条件下形成阴离子糖类硼酸复合物） 、正相色谱 2-6 7 常，溶质的保留受流动相极性的影响很大，随着流动相中 法 、配位体交换色谱法 以及强碱性pH 值条件下的阴 离子交换色谱法8 。 含水量的减少，其呈现出更强的保留倾向。图2 说明了这 一点。这种趋势并不仅限于糖醇。在单糖、双糖和寡糖中 9 可选择的寡糖分离方法包括凝胶过滤色谱法 、正相分 亦可见到。 2,5,6,10 11,12 配色谱法 和反相分配色谱法 ，而多糖最常用 的分离方法为凝胶过滤色谱法。 此外，单糖按照碳原子数增加的顺序进行洗脱。例如，戊 糖先于己糖洗脱。在特定类别中，例如己糖，选择性会随 理解这些分离模式的特点并为目标样本选择最佳分离模 着分子结构中的轻微差异而变化，类似的己糖亦是如此， 式，这一点很重要。 这使得该类别的单个成员得以分离。