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生 物 化 学 第三章 核酸化学 课堂测验  DNA双螺旋结构模型要点  信使RNA的主要结构特征 第四节 核酸及核苷酸的性质 一、一般理化性质 ∶ 核酸为多元酸，具有较强的酸性； DNA是线性高分子，粘度极大 均为极性化合物，难溶于有机溶剂。 二、紫外吸收性质 ∶ 嘌呤碱和嘧啶碱均含有共轭双键，因此，核苷、核苷酸、 DNA和RNA在240～290nm范围内均有紫外吸收。 最大吸收峰在260nm左右。 N 7 5 6 1 N 5 4 3 N 8 9 4 3 2 6 1 2 NH N NH 核酸的紫外吸收性质可以用于鉴定DNA和RNA的纯度， 常用A260/A280 比值来判断。 纯DNA ∶A260/A280=1.8 纯RNA ∶A260/A280=2.0 若样品的蛋白质含量增加，A260/A280 比值怎样变化？ 增色效应(hyperchromic effect) ∶当核酸变性或降 解时，其紫外吸收显著增强，这就是核酸的增 色效应。 减色效应(hypochromic effect) ∶当变性的核酸在 一定条件下恢复其原有的性质时，其紫外吸收 的强度又可恢复到原有的水平，这种现象称为 减色效应。 三、核酸和核苷酸的两性解离 ∶ 在核酸和核苷酸分子 中，既含有可以给出 NH2 + H 的磷酸基团，又含 N N + 有可以得到H 的碱性 基团(碱基上的-N= ， O N N 如嘌呤的N 和N 胞 -O P O 1 7 ， O 嘧啶的N )，所以核酸 O- H H 3 和核苷酸是两性化合 HOH H H 物，有等电点。 5 ´－脱氧腺苷一磷酸 四、核酸的变性、复性和分子杂交 1、变性∶ (1) 概念 ∶ 核酸变性是指核酸分子中双螺旋区域的碱基对之 间的氢键受某些理化因素的作用而破坏，变成单 链的过程。 核酸变性不涉及共价键的断裂，所以变性后 相对分子量不变，但其理化性质和生物功能 都会发生变化，最重要的表现为 ∶ 溶液粘度降低 沉降速率增加 紫外吸收显著增强 ∶DNA可增加20-25% RNA可增加10%左右。 生物功能丧失或减弱。 DNA变性的 本质：双链 间氢键的断 裂 (2) 引起核酸变性