专题5课题1 DNA的粗提取与鉴定课件人教版选修一.ppt
金品质?高追求 我们让你更放心 ! ◆生物?选修1(生物技术实践)?(配人教版)◆ 金品质?高追求 我们让你更放心! 返回 ◆生物?选修1(生物技术实践)?(配人教版)◆ 课题1 DNA的粗提取与鉴定 DNA和蛋白质技术 DNA的提取是现代生物技术进行 中药鉴别的最关键步骤。总DNA的有 效提取要求材料中的DNA尽可能少的 降解。但用于生药真实性鉴别的药材 在干燥、加工、贮藏等过程中均造成 了DNA不同程度的降解,一般DNA的 含量也比较低。药材中次生代谢产物含量较高,会干扰提取。另外也可能有微生物引起的外源DNA的污染。DNA的质量将直接关系到实验的成败。不同的研究目的对DNA的纯度和量的要求不尽相同。本课题将为你提供从生物体内直接提取DNA的机会。 知识清单 DNA的粗提取和鉴定 1.DNA的粗提取 (1)基本思路:利用DNA与______、________和______等在物理和化学性质方面的______,提取DNA,去除其他成分。 (2)方法和原理 ①DNA和________等其他成分在不同浓度的______溶液中溶解度不同,利用这一特点选择适当的________就能使DNA充分溶解,而使______沉淀,或者相反,以达到分离目的。 1.(1)RNA 蛋白质 脂质 差异 (2)①蛋白质 NaCl 盐浓度 杂质 ②DNA不溶于______,但是某些______则可溶于其中。 ③______能水解蛋白质,但是对______没有影响。 ④大多数蛋白质不能忍受________的高温而发生变性,而DNA在________以上才会变性。 ⑤________能瓦解细胞膜,但对DNA无影响。 2.DNA的鉴定 在沸水浴的条件下,DNA遇________会被染成蓝色。 ②酒精 蛋白质 ③蛋白酶 DNA ④60~80 ℃ 80℃ ⑤洗涤剂 2.二苯胺 尝试应用 1.DNA在下列浓度的NaCl溶液中,溶解度最低的是( ) A.2 mol·L-1 B.0.015 mol·L-1 C.0.14 mol·L-1 D.5 mol·L-1 解析:DNA在2 mol/L NaCl溶液中溶解度最高,在0.14 mol/L NaCl溶液中溶解度最低,并且DNA在冷却的酒精溶液中会析出白色丝状物。 答案:C D 2.鉴定DNA的试剂及出现的颜色反应是( ) A.斐林试剂、砖红色 B.苏丹Ⅲ染液、橘黄色 C.双缩脲试剂、紫色 D.二苯胺试剂、蓝色 知识清单 实验设计 1.选取实验材料:选用________的生物组织,成功的可能性更大。 2.破碎细胞,获取含DNA的滤液:动物细胞的破碎比较容易,例如,在鸡血细胞液中加入一定量的________,同时____________,过滤后收集滤液即可。如果是植物细胞,需要先用________溶解________。 3.去除滤液中杂质 (1)方案一:通过控制________的浓度去除______。 1.DNA含量较高 2.蒸馏水 用玻璃棒搅拌 洗涤剂 细胞膜 3.(1)NaCl溶液 杂质 (2)方案二:直接向滤液中加入____________,反应10~15 min,________中的________能够分解蛋白质。 (3)方案三:将滤液放在________的恒温水浴箱中保温10~15 min,注意严格控制温度范围,使________沉淀析出而________分子还未变性,可以将DNA与蛋白质分离。 4.DNA的进一步提纯 利用DNA不溶于冷却的________这一原理,可从______中析出较纯净的DNA,此时DNA的状态为__________。 (2)嫩肉粉 嫩肉粉 木瓜蛋白酶 (3)60~75 ℃ 蛋白质 DNA 4.95%酒精 滤液 白色丝状物 5.DNA的析出与鉴定 (1)DNA的析出:DNA的析出用的是与滤液体积相等的、______的______溶液。 (2)DNA鉴定:鉴定DNA时在试管中先加入物质的量浓度为________的NaCl溶液5 mL。两支试管中其中一支加入DNA丝状物,各加入二苯胺________。 在沸水浴的条件下,DNA遇__________会被染成蓝色,因此__________可以作为鉴定DNA的试剂。 5.(1)冷却 酒精 (2)2 mol/L 4 mL 二苯
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