知母总黄酮提取工艺的研究.docVIP

　　知母总黄酮提取工艺的研究 作者：闻永举， 能力强 ，申秀丽 【摘要】 目的建立知母中总黄酮提取工艺，为知母总黄酮开发和利用提供依据。方法对提取方法、提取溶剂、提取时间进行研究，采用紫外分光光度法测定知母中总黄酮含量。结果知母中总黄酮较佳提取工艺为： 70% 乙醇超声提取 30min。结论该方法简便、快速、准确，可作为知母中总黄酮提取及含量测定方法。 【关键词】 知母； 紫外分光光度法； 总黄酮； 芒果苷 Abstract：ObjectiveTo estable a method of extraction technology of total flavonoids to offer a basis for Anemarrhenas development. MethodsIt ethod, solvent, time of extraction of Anemarrhenas tatol flavonoids and ined tatol flavonoids content of Anemarrhena by UV-spectrophotometry. ResultsIt in by 70% acohol.ConclusionThis method ple, quick, and accurated, and suitable to extract and determine total flavonoids content of Anemarrhena. Key arrhena； UV-spectrophotometry; Total flavonoids； Mangiferin 知母为百合科植物知母Anemarrhena asphodelloides Bge.的干燥根茎。中医理论认为，知母性寒，味苦、甘；入肺、肾、胃经；具有清热泻火、生津润燥功能。临床用于外感热病、高热烦渴、肺热燥咳、骨蒸潮热、内热消渴、肠燥便秘［1］等症。研究表明知母中富含皂苷、黄酮类化合物 ［2］，其总黄酮又以芒果苷含量最高［3］。具有抗病原微生物、抗血小板聚集、降血糖、解热、抗炎、降低转氨酶等生理活性［4，5］，芒果苷是其止咳的有效成分。对于知母的化学研究， 2.4.2 超声提取法取知母粗粉 1 g，精密称定，置 100 ml 量瓶中，加甲醇至刻度，超声提取 30 min，放冷，用甲醇补足至刻度，摇匀，过滤，取续液 5 ml ，置于 50 ml 量瓶中，加 70％ 乙醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。按“2.3项下分别取上述溶液”起，依法操作，测定各供试品溶液的吸收度。结果见表 1。 表1 不同提取方法对知母总黄酮含量的影响 表1表明以上两种提取方法差别不大，回流提取法方法繁琐，耗时，能耗大；而且知母含有较多的黏液质，提取液较难过滤。而超声提取法的方法更方便、简单、快速，易于过滤。因此,选择超声提取法提取知母总黄酮。 2.5 提取溶剂的考察按照上述优选的方法，分别以甲醇和 70％ 乙醇作为提取溶剂，提取知母总黄酮，并进行含量测定，（见表2）。表 2 表明甲醇、70％ 乙醇提取知母总黄酮差别不大，由于甲醇有毒，对环境有污染，选择 70％ 乙醇作为知母总黄酮提取溶剂。表2 不同溶剂对知母总黄酮含量的影响 2.6 提取时间的考察分别取知母粗粉1 g，精密称定，置于 100 ml 量瓶中，加70％ 乙醇，稀释到刻度，分别超声 20，30，40 min，分别按“2.4.2项下放冷处理”起，依法操作,分别制备供试品溶液，并分别测定（见表3）。表3表明超声 30 min，知母总黄酮含量不再提高，因此，选择超声提取时间为 30 min。 表3 超声时间对知母总黄酮的影响 时间t/min吸收度A202.007 6302.138 8402.138 7 n＝3 2.7 供试品溶液的制备按照上述优选的工艺参数制备供试品溶液，取知母粗粉1 g，精密称定，置100 ml圆底烧瓶中，加70％乙醇至刻度，超声提取30 min，放冷，用 70％乙醇补足至刻度，摇匀，滤过，取续液5 ml，置于50ml 量瓶中，加70％乙醇至刻度，摇匀，即得供试品溶液。 2.8 精密度实验取“2.7”项下溶液，在 258 nm 波长下，连续测定 5 次，其吸收度的 RSD=0.09％，表明仪器精密度良好。 2.9 样品溶液稳定性考查 取“2.7”项下溶液，每隔 2 h 测定1次，测定5次，其吸收度的 RSD=0.09％，表明溶液稳定性良好。 2.10 重现性实验取同一批的知母粉末5份，分别按“2.7”项下制备样品溶液，并按样品测定方法，测定5次，芒果苷含量9.57 mg/g， RSD=1.72%，表明样品重现性良好。 2.11 加样回收率实验 取已