砂仁及其混淆品的高效液相色谱指纹图谱鉴别研究.docVIP

　　砂仁及其混淆品的高效液相色谱指纹图谱鉴别研究 作者：王祥培，吴红梅，赵杨，孙宜春，靳凤云，万德光 【摘要】 　　目的建立砂仁及其混淆品的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱鉴定方法。方法采用RP-HPLC（DAD）法，梯度洗脱，测定阳春砂、海南假砂仁及艳山姜的指纹图谱，并作相似度比较分析。结果砂仁及其混淆品的HPLC指纹图谱有明显差异。结论HPLC指纹图谱具有重现性好，特征性强，方法简便等特点，可用于砂仁与其混淆品药材的鉴别。 【关键词】 砂仁 混淆品 高效液相色谱 指纹图谱 　　Abstract：ObjectiveTo establish HPLC fingerprint for the identification　of Amomum villosum and its adulterants.MethodsChromatographic fingerprint of Amomum villosum，Amomum chinense and Alpinia zerumbet ined by RP-HPLC(DAD) and the gradient elution mode atographic separation,data ilarity Evalution Softilarity of samples. ResultsThere omum villosum and its adulterants. ConclusionHPLC fingerprint method is repeatable and feasible and can be suitable for identifying Amomum villosum and its adulterants. 　　Key omum villosum ; Adulterants; HPLC; Fingerprint 　　砂仁为姜科植物阳春砂Amomum villosum Lour.绿壳砂A. villosum Lour. var. xanthioides T. L. omum villosum Lour. 的干燥成熟果实；海南假砂仁购于四川成都，经笔者鉴定为姜科植物海南假砂仁Amomum chinense Chun ex T.L.a公司Diamonsil C18（250 mm×4.6 mm,5 μｍ）；流动相为乙腈（A）与0.1%磷酸（B）梯度洗脱，梯度条件0→11 min，A（%）0.5～5，B（%）99.5～95，11→61min，A（%）5～20，B（%）95～80，61→75 min，A（%）20～25，B（%）80～75，75→80 min，A（%）25～25，B（%）75～75；流速0.8 ml/min；柱温25℃；检测波长258 nm；参比波长360 nm；分析时间80 min；进样量10 μl。 　　2.2 供试品的制备精密称取药材细粉2.0 g，加石油醚（60～90℃）50 ml，超声15 min，滤过，残渣挥干溶剂，加甲醇50 ml回流1 h，滤过。残渣加甲醇50 ml，继续回流1h，滤过，合并两次滤液。置蒸发皿水浴挥干溶剂，残渣加甲醇溶解并定容至10 ml。用微孔滤膜（0.45 μm）滤过，取续滤液，即得。 　　2.3 对照品的制备精密称取槲皮苷对照品适量，加甲醇制成24.72 μg/ml的溶液，作为对照品溶液。 　　2.4 方法学考察以购于广东深圳的阳春砂药材为样品，对其稳定性﹑仪器精密度﹑重复性作了相应考察，结果证明稳定性及重复性良好。 　　2.4.1 精密度实验取同一份供试品溶液，重复进样6次，直观观察指纹图谱的全貌无明显差别，用相似度软件 计算 ，在同一台仪器测得色谱指纹图谱的相似度分别为：0.986，0.992，0.991，0.981，0.982，0.972，均大于0.95。表明该仪器的精密度良好。符合指纹图谱检测要求［3］。 　　2.4.2 稳定性实验取同一份供试品溶液，分别在0，2，6，12，20，30h进行检测，直观观察指纹图谱的全貌无明显差别，用相似度软件 计算 ，在同一台仪器测得色谱指纹图谱的相似度分别为：0.976，0.991，0.980，0.971，0.993，0.985，均大于0.95。表明在30 h内供试品溶液的成分是稳定的。符合指纹图谱检测要求［3］。 　　2.4.3 重复性实验取同一产地的供试品5份，同法检测，直观观察指纹图谱的全貌无明显差别，用相似度软件计算，在同一台仪器测得色谱指纹图谱的相似度分别为：0.981，0.955，0.965，0.973，0.979，均大于0.95。表明该方法的重复性较好，符合指纹图谱检测要求［3］。.L.编辑。 　　2.5 指纹图谱建立精密吸取对照品与供试品溶液各10