分子水平下的小鼠性取向调控研究介绍.pptVIP

社交记忆力实验和雌雄识别实验 之前的实验证明了5-HT神经元的作用，下一步我们要探究5-HT的作用。回忆之前讲的关于5-HT的合成步骤。Tph2作用于中枢神经细胞，Tph1作用于外周5-HT。 我们采用了Tph2－/－型的小鼠，左图表明大脑中5-HT含量大减。 之后的实验与前文所述的Lmx1b系列实验完全相同 雄雄 在只面对雌性时，都一样 面临抉择时，一种小鼠变了 Lmx1b －/－和 Tph2 －/－型的小鼠均是从胚胎期开始缺失5-HT的。为了研究成年期5-HT的影响，我们采用了两种手段：1、用pCBA除去小鼠体内的5-HT；2、试图改变Tph2 －/－的表现型。 pCBA即对氯苯丙氨酸，能够抑制Tph的功能，从而阻断5-HT的合成； HIAA是5-HT的代谢产物 pCBA组与盐水组 雄雄实验对比 以及床铺实验 现在是第二组实验，注射5-HTP。采用了基因型为Tph2+/+和Tph2－/－两种雄性小鼠。图中5-ＨＴＰ下的＋、－号表示注射５－ＨＴＰ或等量的生理盐水。可见Tph2－/－的各项指标均恢复到野生型水平。 雄雄交配实验，Ｔｐｈ２－／－注射之后四项指标均恢复至野生型水平 配偶选择实验和床铺实验，注射之后也均恢复至野生型水平 Tph2+/+和Tph2－/－只面对雌性的对比试验： 注射５－ＨＴＰ前后， Tph2－/－面对雌性无变化，都与无注射的野生型保持一致。而Tph2+/+注射后减少了雄－雌交配！而此时他的５－ＨＴ浓度增加！由此可以得到推论：高于正常野生型的５－ＨＴ浓度会抑制雄－雌交配，而处于正常野生型与Tph2－/－的浓度不影响雄－雌交配。 (1)the ratio of male–male and male–female interactions was repeatedly measured to analyse sexual preference; (2) Lmx1b-/- males showed increased USVs towards males but not towards females; (3)in mating choice, the latency, frequency and duration of Lmx1b-/- males to mount males, but not to mount females, was changed; (4) in bedding preference, Lmx1b-/- and Tph2-/- males showed an increase in time spent over male bedding but a decrease in time over female bedding; (5) wild-type males always mounted females before males but a significant fraction of Lmx1b-/- or Tph2-/- males mounted males first; (6) in the genital odour preference assay, both Lmx1b-/- and Tph2-/- males showed a decrease in time on female genital odour, which could not be explained by hypersexuality; (7) when presented with an oestrous target female, neither Lmx1b-/- males nor Tph2-/- males were different from wild-type males. 总结： 参考资料： Molecular regulation of sexual preference revealed by genetic studies of 5-HTin the brains of male mice . Nature 09822 Cre 重组酶结构与功能的研究进展 . 生物工程学报 Vol. 18 　No. 5 以及维基百科、百度百科有关词条 羟念“抢”，即-OH * 5-HT在大脑中是神经递质！！整个实验对于微观方面发生了什么，我们并不了解。 * 色氨酸——（色氨酸羟化酶TPH）——5-HTP——（5-HTP脱羧酶）——5-HT 鼠类同样适用 * * 即雄雄实验 * Lmx1b+/+、Lmx1b+/-、 Lmx1b－/－在面对雌性时发出的USVs相似。（1.e-g） 然而，Lmx1b－/－对雄性发出USVs的百分比显著高于其他三种（1.f）