实验一微生物培养基的配制和灭菌.ppt

课堂纪律 严格遵守实验室规章制度 严肃课堂纪律 不允许无故旷课、早退 迟到 工作服 进入微生物实验室的注意事项 1.进入实验室必须穿白大褂 2.实验室内不准吃东西 3.在实验室内不要趴在桌子上 4.实验完成后值日生留下做好清洁工作（值日工作实行组长负责制，纳入实验成绩） 5.离开实验室前洗手 6.实验现象要隔天观察的实验，必须要按时到实验室记录实验现象 实验安排 实验一 微生物培养基的配制和灭菌 实验二 微生物的纯培养技术 实验三 显微镜油镜的使用及细胞形态的观察 实验四 土壤、水的细菌学检查 实验五 放线菌、霉菌及酵母菌的形态观察 实验六 环境因素对微生物的影响 实验七 微生物生理生化反应观察 实验八 微生物遗传实验 实验报告要求 一个实验，一份实验报告，有连续性的实验等到做完后再写实验报告。 实验报告内容： 1.实验项目名称 2.实验目的 3.实验原理 4. 实验步骤 5.实验结果与分析（即使实验失败也要写好分析） 6.思考题 实 验 一 微生物培养基的配制和灭菌 一、实 验 目 的 了解培养基的配制原理和方法，掌握其配制过程。 掌握加压蒸汽灭菌法的原理及其使用方法。 二.实 验 原 理 1. 培养基是供微生物生长、繁殖、代谢的混合养料。不同微生物对营养物质的要求各不相同，加之实验和研究的目的不同，所以培养基的种类很多，使用的原料也各有差异，但从营养角度分析，培养基中一般含有微生物所必需的碳源、氮源、无机盐、生长素以及水分等。另外，培养基还应具有适宜的pH值、一定的缓冲能力、一定的氧化还原电位及合适的渗透压。 培养基按成分可分为天然培养基、合成培养基和半合成培养基；按物理状态可分为固体培养基、半固体培养基（0.2%～0.5%的琼脂）和液体培养基；按用途可分为基础培养基、营养培养基、鉴别培养基和选择培养基等。 培养基 是指由人工配制的、适合微生物生长繁殖或产生代谢产物用的混合营养料。 培养基的种类 按照培养基的物理状态可分为 1.液体培养基：不加凝固剂的液体状态培养基。 2.固体培养基：在液体培养基中加入2%左右的凝固剂的固体状态的培养基。 3.半固体培养基：在液体培养基中加入0.2—0.5%凝固剂而成的半固体状培养基。 （一）平板固体培养基制作 （由第1,2,3,4组同学各做2X100ml） 1.称取一定量的营养琼脂到250ml的三角瓶中. 2. 加入100mL水. 3.塞上硅胶塞,用牛皮纸包扎好; 4.高压蒸汽灭菌 5.灭菌后,当培养基冷却至50℃左右时,倾注平皿(每100ml可制备5-6个平皿) 6.凝固后放冰箱备用 （二）斜面培养基制作（由第5,6组同学各做25支斜面培养基） 1.称取一定量的营养琼脂到100ml的三角瓶中. 2. 加入100mL水. 3. 放入水浴锅内溶解. 4. 在空试管内倒入2～3mL已经溶解好的培养基，【注意尽量不要让培养基沾到试管口】塞好硅胶塞. 5.放入烧杯中,高压蒸汽灭菌. 6.摆斜面,凝固后放冰箱备用. （三）半固体培养基制作（由第7,8组同学各做25支半固体培养基） 1.按牛肉膏蛋白胨半固体培养基配方称取相应成分到250ml的三角瓶中. 2. 加入100mL水. 3. 放入水浴锅内溶解. 4. 在空试管内倒入2～3mL已经溶解好的培养基，【注意尽量不要让培养基沾到试管口】塞好硅胶塞. 5.放入烧杯中,高压蒸汽灭菌. 6.凝固后放冰箱备用. 牛肉膏蛋白胨半固体培养基按下列配方及方法配制 牛肉膏: 0. 3g 蛋白胨: 1g NaCl: 0.5g 琼脂: 0.3g 水: 100ml pH: 7.0-7.2 放入水浴锅内溶解后,分装到试管中,灭菌备用. （四）液体培养基制作（由第9,10组同学各做25支液体培养基） 1.按牛肉膏蛋白胨液体培养基配方称取相应成分到250ml的三角瓶中. 2. 加入100mL水. 3. 充分溶解. 4. 在空试管内倒入2～3mL已经溶解好的培养基，【注意尽量不要让培养基沾到试管口】塞好硅胶塞. 5.放入烧杯中,高压蒸汽灭菌. 6. 冷却后放冰箱备用. 牛肉膏蛋白胨液体体培养基按下列配方及方法配制 牛肉膏: 0. 3g 蛋白胨: 1g NaCl: 0.5g 水: 100ml pH: 7.0-7.2