实验二发酵罐认知及使用培训.ppt

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实验二发酵罐认知及使用培训

发酵罐认知及使用培训 主要内容 1.各部件名称及功能 2.电极及电极标定 3.发酵罐的灭菌 4.发酵 5.注意事项 1.各部件名称及功能 发酵罐由罐体、管路、主机及附属设备四部分组成 1)罐体 电机、泡沫电极、空气过滤器、空气前压力表、流量计、尾气管、尾气冷凝管、视窗、照明灯、夹套、温度电极、取样阀、罐底阀 2)管路 蒸汽 一路蒸汽进发酵罐夹套 二路蒸汽进发酵罐 三路蒸汽进取样管路 空气:进罐 水 一路进发酵罐夹套;电加热器、循环水泵、电磁阀 二路进排气管夹套 排气管 排水管 3)主机 电源开关、显示屏、加热指示灯、注水开关、搅拌开关、补料泵、电极线 4)附属设备 蒸汽发生器 空气压缩机 2.电极及电极标定 pH电极、溶氧电极、泡沫电极、温度电极 pH电极、溶氧电极使用时需标定 1.pH电极和溶氧电极在标定之前要在缓冲液中浸泡并联机通电30min以上。 2.pH电极先标定零点(6.86),再标定斜率(4.00)。 3.在灭菌达到100℃时标定溶氧0%,(也可在饱和的亚硫酸钠溶液中标定0%)发酵参数设置完毕但还未接种时标定100%。 3.发酵罐的灭菌 1)准备 开蒸汽发生器、开空气压缩机、开水源开关、标定电极、装罐。 2)预热(0-90℃) 开搅拌器,转速为200-300rpm;温度设为手动 微开排气阀、开排夹套水阀,三通阀提到上挡位,其它阀均关,缓慢开一路蒸汽阀,蒸汽进夹套预热 3)加热(蒸汽进罐)90-121℃ 停搅拌,开空气过滤器排冷凝水阀,开二路蒸汽阀,至基本无冷凝水排出,关小排冷凝水阀,三通阀放到下挡位,蒸汽进罐(调整过滤器前压力表示数在0.12-0.16MPa之间) 到100℃约2min后关闭排气阀 此时可标定溶氧为0% 4)保温阶段(121℃,20min) 开排气阀,旋松接种口, 开三路蒸汽阀—开取样阀—开罐底阀,6-7min后关闭,关闭顺序相反 调节进气量和排气量,使温度维持在121℃ 5)降温(121 ℃-发酵温度) 关接种口,三通阀提至上挡位,关二路蒸汽阀,关一路蒸汽阀,尾气关小 开空气过滤器排冷凝水阀,开空气阀,至无冷凝水排出时关闭排冷凝水阀,三通阀放至下档位。空气进罐 点注水开关,关闭排夹套水阀,开启进水阀和循环管线切断阀,调温度为自动。温度低于100℃时开搅拌 冷却过程中,罐压严禁掉零。 4.发酵 1)温度降至发酵温度后,设置各发酵参数,溶氧电极校100% 2)火焰圈接种(罐压调小后再接种) 3)发酵初始化 4)发酵结束,数据存盘 5)放料,清洗,关仪器。 5.注意事项 1.最高工作压力不大于0.2Mpa,进罐空气压力应不大于0.2Mpa,最高消毒温度为126℃。 2.培养基装量:5L罐最高不超过4L,10L罐最高不超过8L,最少装量以所有的电极都没于液面以下为准。 3. 在过滤器消毒时,流经空气过滤器的蒸汽压力应在0.12~0.14MPa之间,最高不得超过0.17MPa。压力过低将造成灭菌不彻底,压力过高则空气过滤器滤芯有可能被损坏而失去过滤能力。 4. 在实消结束后冷却时,发酵罐内严禁产生负压,以免损坏设备或造成污染。开始控温前把注水开关打开,确保夹套中有水 5. 接种时要保证无菌环境,需要在进料口放置火圈。 6. 发酵过程中,罐压应维持在0.03~0.05MPa之间,以免引起污染。 7.发酵结束后数据存盘,关闭总电源前,请将控制器退回主菜单,然后按Ctrl+F6关闭控制程序,然后关闭电源。 8.运行结束后,关闭自来水阀,空气源,蒸汽发生器。 9.每次移动发酵罐的时候都要先把溶氧电极和pH电极取下来,防止在挪动的过程中碰撞损坏电极。 10.手动清洗罐体前要先取下溶氧和pH电极,再打开发酵罐的盖子,清洗时要用柔软的棉布轻轻擦洗内部,绝对不可以使用硬物刮发酵罐的内壁。否则以后的发酵罐容易染菌。 11.使用发酵罐应登记,使用后由负责人检查签字。 * * *

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