第五章酶的固定化20131128.pptVIP

活化载体 载 体 + 活化 + 例如：醛缩酶亚基活力的测定 8mol/L尿素 透析 醛缩酶亚基活力测定 固定化衍生物 活力/U 蛋白质/mg 比活力/U·mg-1 全酶 100 100 4.5 亚基 9.8 27.5 1.6 （3）揭示酶原激活机理 有时酶原激活并不涉及蛋白水解。 如：酪氨酸酶，固定化后，不需水解就可活化至天然酶活的20％～30％。 说明蛋白酶结构重排后可激活酶的一些活力。 （4）研究蛋白质-核酸分子结构 如：用双功能试剂测定酶侧链基团之间的距离； 用交联法分析寡聚蛋白的四级结构。 2. 亲和分离系统 （1）生物亲和技术的基础：生物活性化合物特异性信息的综合。 （2）亲和分离 利用生命现象中生物分子间特有的高亲和力、高专一性，可逆结合而设计的一种十分巧妙的纯化方法，是唯一的一种能够体现待分离物质间生物学功能差异的分离方法。 （3）亲和分离种类 1）将某种作为配基的生物分子偶联于固相载体上制成亲和吸附剂，用作色谱的填充剂来分离与之特异结合的配体，然后将配体洗脱下来并回收-亲和色谱法。 2）将配基偶联于载体上，用于选择性地去除某些污染物。 3）将细胞表面抗原分子对应的抗体偶联于载体上用于细胞的标记、分离及性质研究。 （4）应用 1）物质分离 2）微量物质的分析 3）肽库及抗体库的筛选 4）制药工业（亲和色谱用于药用重组蛋白的纯化