芒果核提取物体外抑菌及急性毒性实验研究.docVIP

　　芒果核提取物体外抑菌及急性毒性实验研究 作者：莫武桂, 刘华钢 郑陈光 黄维真 贝为武 佘尚扬 韦蓉 【摘要】 　　目的研究芒果提取物的体外抑菌效果及其使用的安全性。方法采用二倍稀释法及琼脂扩散法，观察芒果核提取物对常见肠道感染致病菌的体外抑菌作用；用小鼠空腹经口灌胃给予芒果核提取物,观察小鼠出现的毒性反应、剂量毒性效应的关系及主要靶器官毒性反应的性质和程度。结果芒果核提取物对标准和耐药志贺痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌、大肠埃希菌有不同程度体外抑菌作用；小鼠灌胃最大耐受量40 g/kg，相当于临床用量的50倍。结论芒果核提取物对常见3种肠道感染菌具有较明显的体外抑菌作用及具有良好的安全性。 【关键词】 芒果核提取物 体外抑菌作用 最低抑菌浓度 急性毒性实验 　　Abstract:ObjectiveTo study bacteriostasis and its practical safe of Mango seed extract in vitro.MethodsThe in vitro bacteriostasis of Mango seed extract, double-diluted and agar-diffused, on mon intestinal infection pathogenic bacteria instered Mango seed extract and toxic reaction, dose-toxic effect relationship and the toxic reaction of the major target organs aximal tolerated dose of intragastric administration for mice es clinic dosage.ConclusionMango seed extract possesses in vitro bacteriostasis and is favorable safe on 3 types of mon intestinal infection bacteria. 　　Key l浸泡，30 min后加热煮沸，文火15 min滤出，再加水100 ml，按上述方法再次操作滤出药液，合并两次药液，用文火浓缩至50 ml，制成原液备用。 　　1.2 菌株标准志贺痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌和大肠埃希菌均由广西医科大学微生物教研室提供，耐药志贺痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌和大肠埃希菌均由广西壮族自治区妇幼保健院检验科细菌室提供，常规牛肉膏、水解酪蛋白培养基37℃培养24 h后吸取菌液用培养基稀释，用血细胞计数板计数将菌悬液调整为约106个/ml备用。 　　1.3 动物清洁小鼠40只, 雌雄各半, 体重18～ 22 g, 由广西医科大学实验动物中心提供。 　　 2 方法 　　2.1 最低抑菌浓度（MIC）的测定采用二倍稀释法测定芒果核提取物MIC，即取12支无菌试管编号，1～10号为一定梯度芒果核提取物含菌液，11号取菌悬液1 ml为不加试验药物的菌液对照管，12号管取芒果提取物1 ml为不加菌悬液的药物对照管，稀释后的芒果核提取物最终浓度为500，250，125，62.5，31.2，15.6，7.8，3.9，1.95，0.98 mg/ml摇匀后置于37℃的恒温箱中培养24 h后观察结果。 　　2.2 判定标准首先观察11号菌液对照管细菌呈混浊状生长，而12号药物对照管无细菌生长，呈透明状的前提下，以不出现混浊的最低芒果核提取物浓度为其MIC。 　　2.3 抑菌实验将标准和耐药志贺痢疾杆菌、福氏痢疾杆菌、大肠埃希菌分别用取菌环致密接种到血平板营养基表面,以无菌操作将已用芒果核提取物浸泡的带有药液的直径0. 4 cm的滤纸片贴到培养基上, 37℃培养24 h,观察测量抑菌环直径。重复3次,取其平均值。 　　2.4 急性毒性实验动物采用雌、雄分别随机均衡分组法 , 共分两组, 每组20只，雌雄各半。采用空腹经口灌胃给药。各组药物浓度为最大浓度, 灌胃体积相同, 均为每只每次给药0.4 ml, 每隔12 h给药1次，共给药两次，按急性毒性实验常规方法灌胃［1］，测定芒果核最大给药量，灌胃前禁食12 h, 但不禁水。对照组给予相同剂量的生理盐水。 　　2.5 观察实验前先将动物按性别分笼在实验室群养观察1 d。给药后当天密切观察12 h, 并详细记录观察结果,以后每天上午8～9时及下午15～16时各观察1 h, 并记录观察结果, 共连续观察14 d。对观察其中死亡的动物立即进行尸体解剖, 对尸检中发现异常者, 进行病理切片检查。 　 　3 结果 　　3.1 最低抑菌浓度芒果核提取物对临床常见肠道致病菌的MIC见表