离子液体双水相中铁（Ⅲ）与胃蛋白酶作用研究.pdfVIP

第4O卷第 12期 应 用 化 工 Vo1．40No．12 2011年 12月 AppliedChemicalIndustry Dec．2011 离子液体双水相 中铁 (Ⅲ)与 胃蛋 白酶作用研究 王玉峰，陈琳琳，邓凡政 (淮北师范大学 化学与材料科学学院，安徽 淮北 235000) 摘 要：运用荧光光谱和紫外光谱，研究了在离子液体双水相体系中铁 (Ⅲ)与胃蛋白酶的相互作用。结果表明， Fe”对胃蛋白酶产生了荧光猝灭作用 ，且属于静态猝灭过程。计算得到在 300K和310K下的结合常数分别为 2．56×10L／mol和8．91×10L／mol，结合位点数分别为 1．21和 1．14。热力学参数表明，Fe¨与胃蛋白酶之间的 相互作用力类型为静电作用。用同步荧光法探讨了Fe”对 胃蛋白酶构象的影响。 关键词：铁 (Ⅲ)；胃蛋白酶；荧光猝灭；离子液体双水相 中图分类号：TQ252．3；O613．6 文献标识码：A 文章编号：1671—3206(2011)12—2116一o3 Studyoninteractionbetweeniron(m)andpepsinin ionicliquid aqueoustwo-phase WANGYu-feng，CHENLin—lin，DENGFan—zheng (CollegeofChemistryandMaterialScience，HuaibeiNormalUniversity，Huaibei235000，China) Abstract：TheinteractionbetweenFe¨ andthepepsinwasinvestigatedbyfluorescenceandUV absorp． t．ionspec~oscopyinionicliquidaqueoustwo—phase．Theresultsshowedthattheinteractions．whichresu1． tedinhtefluorescencequenchingofpepsin，belongedtoastaticquenchingmechanism．Andbycalcula— tionthebindingconstantswere2．56×10 lJmol(300K)and8．91×10 L／mol(310K)，andhte bindingsiteswere1．21(300K)and1．14(310K)．Thethermodynamicparametersshowedthatthein． teractionbetween Fe¨ and pepsinwasmainly driven by electrostaticforce ． Synchronousfluorescence spectrum wasusedtoinvestigatetheconformationalchangeofpepsin． Keywords：iron(11I)；pepsin；fluorescencequenching；ionicliquidauqeoustwo—phase 胃蛋白酶 (PEP)是一种消化性蛋 白酶，由胃部 1 实验部分 中的胃粘膜主细胞所分泌，其功能是将食物中的蛋 1．1 试剂与仪器 白质分解为小的肽片段；在医药上用作消化剂等。 胃蛋白酶、硫酸铁铵、甲基咪唑、溴代正丁烷、磷 离子液体双水相是近年才发展起来的一种绿色萃取 酸二氢钠均为分析纯；实验用水为二次去离子水。 分离体系，与传统有机溶剂比较，具有不挥发、毒性 RF一5301PC荧光仪；TU-1901双光束紫外可见